Ny Javascript dia tsy mandeha amin'izao fotoana izao ao amin'ny navigateur.Rehefa tsy mandeha ny javascript dia tsy mandeha ny fiasa sasany amin'ity tranokala ity.
Soraty ny antsipiriany manokana sy ny zava-mahadomelina manokana mahaliana anao, ary hampifanaraka ny fampahalalana omenao amin'ny lahatsoratra ao amin'ny tahiry be dia be izahay ary handefa kopia PDF anao amin'ny alàlan'ny mailaka ara-potoana.
Tsara kokoa ve ny nanopartikely kely kokoa?Fantaro ny fiantraikan'ny biôlôjika amin'ny fitambaran'ny nanopartikely volafotsy miankina amin'ny habe ao anatin'ny fepetra biolojika mifandraika amin'izany
Mpanoratra: Bélteky P, Rónavári A, Zakupszky D, Boka E, Igaz N, Szerencsés B, Pfeiffer I, Vágvölgyi C, Kiricsi M, Kónya Z
Péter Bélteky,1,* Andrea Rónavári,1,* Dalma Zakupszky,1 Eszter Boka,1 Nóra Igaz,2 Bettina Szerencsés,3 Ilona Pfeiffer,3 Csaba Vágvölgyi,3 Mónika Kiricsi of Environmental Chemistry, Hungary, Hungary Informatics , Oniversiten'i Szeged;2 Departemantan'ny Biochemistry sy ny Biolojia Molecular, Fakiolten'ny Siansa sy Fampahalalam-baovao, Oniversiten'i Szeged, Hongria;3 Departemantan'ny Mikrobiolojia, Fakiolten'ny Siansa sy Fampahalalam-baovao, Oniversiten'i Szeged, Hongria;4MTA-SZTE Reaction Kinetics and Surface Chemistry Research Group, Szeged, Hongria* Ireo mpanoratra ireo dia nandray anjara mitovy amin'ity asa ity.Fifandraisana: Zoltán Kónya Department of Applied and Environment Chemistry, Faculty of Science and Informatics, University of Szeged, Rerrich Square 1, Szeged, H-6720, Hongria Phone +36 62 544620 Email [Email protection] Tanjona: Silver nanoparticles (AgNPs) dia iray amin'ireo nanomaterials be mpitia indrindra, indrindra noho ny fampiharana biomedical.Na izany aza, noho ny fivondronan'ny nanopartikel, ny cytotoxicity tsara indrindra sy ny hetsika antibacterial dia matetika simba amin'ny media biolojika.Ao amin'ity asa ity, ny fitondran-tena aggregation sy ny hetsika biolojika mifandraika amin'ny santionany nanoparticle volafotsy telo samy hafa vita amin'ny citrate miaraka amin'ny savaivony 10, 20, ary 50 nm dia nodinihina.Fomba: Mampiasà mikraoskaopy elektrônika fampitaovana mba hanambatra sy hamaritana ny nanopartikely, hanombantombanana ny fihetsik'izy ireo amin'ny sanda pH isan-karazany, NaCl, glucose ary glutamine amin'ny alàlan'ny fanaparitahana hazavana mavitrika sy spectroscopy hita maso ultraviolet.Ankoatr'izay, ao amin'ny singa antonony kolontsaina sela toy ny Dulbecco dia manatsara ny fitondran-tena mitambatra ao amin'ny Eagle Medium sy Fetal Calf Serum.Vokatra: Ny vokatra dia mampiseho fa ny pH asidra sy ny votoatin'ny electrolyte ara-batana amin'ny ankapobeny dia miteraka fivondronan'ny micron-scale, izay azo alaina amin'ny fananganana corona biomolecular.Tsara ny manamarika fa ny singa lehibe kokoa dia mampiseho fanoherana avo kokoa amin'ny fitaomana ivelany noho ny mitovy aminy.Ny cytotoxicity in vitro sy ny fitsapana antibacterial dia natao tamin'ny fikarakarana sela miaraka amin'ny aggregates nanoparticle amin'ny dingana fanangonana samihafa.Fehiny: Ny vokatray dia mampiseho fifandraisana lalina eo amin'ny fahamarinan-toerana colloidal sy ny poizina amin'ny AgNPs, satria ny fitambarana tafahoatra dia mitarika amin'ny fahaverezan'ny asa biolojika.Ny ambaratonga ambony amin'ny anti-aggregation hita ho an'ny singa lehibe kokoa dia misy fiantraikany lehibe amin'ny poizina in vitro, satria ny santionany toy izany dia mitazona hetsika antimikrobia sy sela mampinono bebe kokoa.Ireo fikarohana ireo dia mitarika amin'ny fehin-kevitra fa, na dia eo aza ny hevitra ankapobeny ao amin'ny literatiora mifandraika amin'izany, ny mikendry ny nanopartikely kely indrindra dia mety tsy ho ny hetsika tsara indrindra.Keywords: fitomboan'ny voa-mpanelanelana, fahamarinan-toerana colloidal, fitondran-tena miankina amin'ny habeny, poizina manimba ny fanangonana
Satria mitombo hatrany ny fangatahana sy ny vokatra vita amin'ny nanomaterials, mihamaro hatrany ny fiheverana ny biosafety na ny hetsika biolojika.Ny nanopartikel volafotsy (AgNPs) dia iray amin'ireo solontena mahazatra indrindra novolavolaina, fikarohana ary ampiasaina amin'ity kilasy fitaovana ity noho ny fananana catalytic, optika ary biolojika tena tsara.1 Amin'ny ankapobeny dia inoana fa ny toetra miavaka amin'ny nanomaterials (anisan'izany ny AgNPs) dia azo lazaina amin'ny ankapobeny amin'ny velaran-tany manokana.Noho izany, ny olana tsy azo ihodivirana dia ny dingana rehetra izay misy fiantraikany amin'ity endri-javatra lehibe ity, toy ny haben'ny poti, ny coating ambonin'ny tany na ny fanangonana, na hanimba mafy ny fananan'ny nanoparticles izay tena ilaina amin'ny fampiharana manokana.
Ny vokatry ny haben'ny poti sy ny stabilizer dia lohahevitra izay voarakitra tsara ao amin'ny literatiora.Ohatra, ny fomba fijery ekena amin'ny ankapobeny dia ny nanopartikely kely kokoa dia misy poizina kokoa noho ny nanopartikely lehibe kokoa.2 Mifanaraka amin'ny literatiora ankapobeny, ny fandinihanay teo aloha dia naneho ny hetsika miankina amin'ny haben'ny nanosilver amin'ny sela mampinono sy ny zavamiaina bitika.3– 5 Ny fanosotra ambonin'ny tany dia toetra iray hafa izay misy fiantraikany lehibe amin'ny toetran'ny nanomaterials.Amin'ny alalan'ny fanampiana na fanovana stabiliser eo amin'ny tavany fotsiny dia mety manana toetra ara-batana, simika ary biolojika hafa ny nanomaterial iray.Ny fampiharana ny capping agents dia matetika atao amin'ny ampahany amin'ny synthesis nanoparticle.Ohatra, ny nanopartikel volafotsy vita amin'ny citrate dia iray amin'ireo AgNPs manan-danja indrindra amin'ny fikarohana, izay novolavolaina tamin'ny alàlan'ny fampihenana ny sira volafotsy amin'ny vahaolana stabiliser voafantina ho fitaovana fanehoan-kevitra.6 Ny citrate dia afaka manararaotra mora foana ny vidiny ambany, ny fisiany, ny biocompatibility ary ny fifandraisana matanjaka amin'ny volafotsy, izay azo hita taratra amin'ny fifampiraharahana isan-karazany, manomboka amin'ny adsorption ambonin'ny tany azo averina mankany amin'ny fifandraisana ionic.Ny molekiola kely sy ny ion polyatomika eo akaikin'ny 7,8, toy ny citrate, polymers, polyelectrolytes, ary ny biolojika dia matetika ampiasaina mba hampitony ny nano-silver ary manao fampandehanana miavaka eo aminy.9-12
Na dia faritra tena mahaliana aza ny mety hanovana ny asan'ny nanoparticles amin'ny alàlan'ny fametahana ny ety ivelany, ny tena anjara asan'ity coating surface ity dia tsinontsinona, manome fitoniana colloidal ho an'ny rafitra nanoparticle.Ny velaran-tany lehibe amin'ny nanomaterials dia hamokatra angovo lehibe amin'ny tany, izay manakana ny fahafahan'ny thermodynamika ny rafitra hahatratra ny angovo faran'izay kely indrindra.13 Raha tsy misy fanamafisana araka ny tokony ho izy, dia mety hitarika amin'ny fivondronan'ny nanomaterials izany.Ny fanangonan-tsonia dia ny fiforonan'ny fitambaran'ny poti-javatra samihafa amin'ny endriny sy ny habeny izay mitranga rehefa mihaona ireo poti-potaka miparitaka ary ny fifandraisan'ny thermodynamika amin'izao fotoana izao dia mamela ny poti hifikitra.Noho izany, ny stabiliser dia ampiasaina mba hisorohana ny fivondronana amin'ny alàlan'ny fampidirana hery fandroahana lehibe ampy eo amin'ireo singa mba hanohitra ny fisintonana thermodynamika.14
Na dia nodinihina tsara aza ny lohahevitra momba ny haben'ny sombin-javatra sy ny fandrakofana ambonin'ny tany ao anatin'ny tontolon'ny fandrindrana ny hetsika biolojika ateraky ny nanopartikely, dia faritra tsy voakarakara loatra ny fanangonana poti.Saika tsy misy fandinihana lalina hamahana ny fahamarinan-toerana koloidan'ny nanopartikely ao anatin'ny fepetra biolojika mifandraika amin'izany.10,15-17 Fanampin'izany, ity fandraisana anjara ity dia tsy fahita firy, izay nodinihina ihany koa ny poizina mifandray amin'ny fanangonana, na dia mety hiteraka voka-dratsy aza izany, toy ny trombose vascular, na fahaverezan'ny toetra irina, toy ny poizina, toy ny aseho amin'ny sary 1.18, 19 aseho.Raha ny marina, ny iray amin'ireo mekanika vitsivitsy fantatra momba ny fanoherana ny nanoparticle volafotsy dia mifandraika amin'ny fanangonana, satria ny sasany amin'ireo karazana E. coli sy Pseudomonas aeruginosa dia voalaza fa mampihena ny fahatsapana ny nano-silver amin'ny fanehoana ny flagellin proteinina, flagellin.Manana fifandraisana ambony amin'ny volafotsy izy io, ka mahatonga ny fanangonana.20
Misy mekanika maro samihafa mifandraika amin'ny poizina amin'ny nanopartikely volafotsy, ary misy fiantraikany amin'ireo mekanika rehetra ireo ny fanangonana.Ny fomba resahina indrindra amin'ny hetsika biolojika AgNP, indraindray antsoina hoe mekanika "Trojan Horse", dia mihevitra ny AgNP ho mpitatitra Ag +.1,21 Ny mekanika soavaly Trojan dia afaka miantoka ny fitomboana lehibe amin'ny fifantohana Ag + eo an-toerana, izay mitarika amin'ny famokarana ROS sy ny depolarization membrane.22-24 Mety hisy fiantraikany amin'ny famotsorana ny Ag+ ny fivondronana, ka hisy fiantraikany amin'ny poizina izany, satria mampihena ny velaran-tany miasa mahomby izay mety hidiran'ny ions volafotsy sy levona.Na izany aza, ny AgNPs dia tsy haneho poizina amin'ny alàlan'ny famoahana ion fotsiny.Ny fifandraisana maro mifandraika amin'ny habe sy ny morphologie dia tsy maintsy jerena.Amin'izy ireo, ny habeny sy ny endriky ny tampon'ny nanoparticle no mamaritra ny toetra.4,25 Ny fanangonana ireo mekanika ireo dia azo sokajiana ho "mekanisma misy poizina vokatry ny poizina."Maro ny fanehoan-kevitra mitochondrial sy membrane surface izay mety hanimba ny organelles ary hiteraka fahafatesan'ny sela.25-27 Koa satria ny fiforonan'ny fitambarana dia misy fiantraikany voajanahary amin'ny habeny sy ny endrik'ireo zavatra misy volafotsy fantatry ny rafitra velona, ​​​​dia mety hisy fiantraikany ihany koa ireo fifandraisana ireo.
Ao amin'ny taratasinay teo aloha momba ny fanangonana ny nanopartikely volafotsy, dia nampiseho fomba fitiliana mahomby misy andrana biolojika simika sy in vitro izahay handinihana ity olana ity.19 Dynamic Light Scattering (DLS) no teknika tiana indrindra ho an'ireo karazana fisafoana ireo satria ny fitaovana dia afaka manaparitaka fotona amin'ny halavan'ny onjam-peo mitovy amin'ny haben'ny potiny.Koa satria ny hafainganam-pandehan'ny Brownian ny poti amin'ny mpanelanelana amin'ny ranon-javatra dia mifandray amin'ny habeny, ny fiovan'ny hamafin'ny hazavana miparitaka dia azo ampiasaina hamaritana ny savaivony hydrodynamic (Z-mean) amin'ny santionany ranoka.28 Fanampin'izany, amin'ny alalan'ny fampiharana ny voltase amin'ny santionany, ny zeta mety (ζ potentiel) ny nanoparticle dia azo refesina mitovy amin'ny Z salan'isa.13,28 Raha toa ka ampy ny sanda tanteraka ny zeta mety (araka ny toromarika ankapobeny> ± 30 mV), dia hiteraka electrostatic repulsion mahery eo amin'ny poti mba hanohitra ny aggregation.Ny résonance plasmon surface (SPR) dia trangan-javatra tsy manam-paharoa, noho ny nanopartikely metaly sarobidy (indrindra ny Au sy Ag).Mifototra amin'ny oscillations elektronika (plasmons surface) an'ireo fitaovana ireo amin'ny nanoscale, dia fantatra fa ny AgNPs spherical dia manana tampon'ny absorption UV-Vis manakaiky ny 400 nm.30 Ny hamafiny sy ny halavan'ny onjam'ny poti-javatra dia ampiasaina mba hanampiana ny valin'ny DLS, satria io fomba io dia azo ampiasaina hamantarana ny fivondronan'ny nanoparticle sy ny adsorption amin'ny biomolecule amin'ny ety ivelany.
Miorina amin'ny fampahalalam-baovao azo, ny cell viability (MTT) sy ny fitiliana antibacterial dia atao amin'ny fomba izay ilazana ny poizina AgNP ho toy ny asan'ny haavon'ny aggregation, fa tsy ny (ny singa ampiasaina matetika indrindra) nanoparticle.Ity fomba tsy manam-paharoa ity dia ahafahantsika mampiseho ny maha-zava-dehibe ny haavon'ny fanangonana amin'ny hetsika biolojika, satria, ohatra, ny AgNPs citrate-terminated dia very tanteraka ny asany biolojika ao anatin'ny ora vitsivitsy noho ny fanangonana.19
Amin'ny asa amin'izao fotoana izao, mikendry ny hanitatra be ny fandraisantsika teo aloha amin'ny fahamarinan'ny colloids mifandraika amin'ny bio sy ny fiantraikany amin'ny hetsika biolojika amin'ny fandalinana ny fiantraikan'ny haben'ny nanoparticle amin'ny fanangonana nanoparticle.Tsy isalasalana fa iray amin'ireo fandalinana momba ny nanopartikel izany.Fomba fijery ambony kokoa ary 31 Mba hanadihadiana ity olana ity, dia nampiasaina ny fomba fitomboan'ny voa-mpanelanelana mba hamokarana AgNPs citrate-terminated amin'ny faritra telo samihafa (10, 20, ary 50 nm).6,32 ho iray amin'ireo fomba mahazatra indrindra.Ho an'ny nanomaterials izay ampiasaina betsaka sy mahazatra amin'ny fampiharana ara-pitsaboana, ny AgNPs citrate-terminated amin'ny habe samihafa dia nofantenana mba handinihana ny mety ho fiankinan-doha amin'ny fananana biolojika mifandraika amin'ny aggregation amin'ny nanosilver.Taorian'ny fampifangaroana ny AgNPs amin'ny habe samihafa, dia nanamarika ireo santionany novokarina tamin'ny alàlan'ny microscopie electron transmission (TEM) izahay, ary avy eo nandinika ireo poti-javatra tamin'ny fampiasana ny fomba fitiliana voalaza etsy ambony.Ho fanampin'izany, eo anatrehan'ny kolontsaina sela in vitro Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) sy Fetal Bovine Serum (FBS), ny fitondran-tena miankin-doha amin'ny habe sy ny fitondran-tenany dia nodinihina tamin'ny sanda pH isan-karazany, NaCl, glucose ary glutamine.Ny toetran'ny cytotoxicity dia voafaritra ao anatin'ny fepetra feno.Ny marimaritra iraisana ara-tsiansa dia manondro fa amin'ny ankapobeny, ny singa kely kokoa no tiana kokoa;Ny fanadihadiana ataonay dia manome sehatra simika sy biolojika hamaritana raha izany no izy.
Nanopartikely volafotsy telo manana habe samihafa no nomanina tamin'ny fomba fitomboan'ny voa natolotr'i Wan et al., miaraka amin'ny fanitsiana kely.6 Ity fomba ity dia mifototra amin'ny fampihenana simika, amin'ny fampiasana ny nitrate volafotsy (AgNO3) ho loharano volafotsy, ny borohydride sodium (NaBH4) ho toy ny fampihenana, ary ny citrate ny sodium ho stabiliser.Voalohany, manomana 75 mL ny 9 mM citrate dihydrate sodium citrate (Na3C6H5O7 x 2H2O) ary hafanaina hatramin'ny 70 ° C.Avy eo, 2 mL amin'ny 1% w / v AgNO3 vahaolana dia nampiana tao amin'ny haino aman-jery fanehoan-kevitra, ary avy eo ny vahaolana ny sodium borohydride vaovao voaomana (2 mL 0,1% w/v) dia narotsaka tao amin'ny fangaro mitete.Ny fampiatoana mavo-volontsôkôlà vokatr'izany dia tazonina amin'ny 70 ° C miaraka amin'ny famporisihana mafy mandritra ny adiny iray, ary avy eo dia nangatsiaka tamin'ny mari-pana.Ny santionany vokatra (antsoina hoe AgNP-I manomboka izao) dia ampiasaina ho fototry ny fitomboan'ny voa amin'ny dingana synthesis manaraka.
Mba hamoronana fampiatoana singa antonony (antsoina hoe AgNP-II), hafanaina 90 mL 7,6 mM citrate solution ho 80 ° C, afangaro amin'ny 10 mL AgNP-I, ary avy eo afangaro 2 mL 1% w/v Ny vahaolana AgNO3 Notazonina teo ambanin'ny famporisihana mekanika mahery vaika nandritra ny adiny 1, ary avy eo dia nangatsiaka ny santionany tamin'ny mari-pana.
Ho an'ny ampahany lehibe indrindra (AgNP-III), avereno ny dingana fitomboana mitovy, fa amin'ity tranga ity, ampiasao 10 mL ny AgNP-II ho fampiatoana voa.Rehefa tonga any amin'ny mari-pana ao amin'ny efitrano ny santionany, dia mametraka ny fifantohana Ag nominal izy ireo mifototra amin'ny votoatin'ny AgNO3 manontolo amin'ny 150 ppm amin'ny alàlan'ny fanampiana na famafazana solvent fanampiny amin'ny 40 ° C, ary amin'ny farany dia mitahiry azy ireo amin'ny 4 ° C mandra-pampiasaina bebe kokoa.
Ampiasao ny FEI Tecnai G2 20 X-Twin Transmission Electron Microscope (TEM) (FEI Corporate Headquarter, Hillsboro, Oregon, Etazonia) miaraka amin'ny 200 kV acceleration voltage mba handinihana ny toetran'ny morphologique amin'ny nanoparticles ary hisambotra ny lamin'ny electron diffraction (ED).Farafahakeliny 15 solontena sary (~ 750 poti) no tombanana tamin'ny fampiasana ny ImageJ fonosana rindrambaiko, ary ny histograms vokatra (sy ny sary rehetra ao amin'ny fianarana manontolo) dia noforonina tao amin'ny OriginPro 2018 (OriginLab, Northampton, MA, Etazonia) 33, 34.
Ny savaivony hydrodynamic (Z-average), ny zeta potential (ζ-potential) ary ny resonance plasmon surface (SPR) amin'ny santionany dia norefesina mba hanehoana ny toetran'izy ireo voalohany.Ny savaivony hydrodynamic salan'isa sy ny mety ho zeta ny santionany dia refesina amin'ny alalan'ny Malvern Zetasizer Nano ZS fitaovana (Malvern Instruments, Malvern, UK) mampiasa ny fanary miforitra capillary sela amin'ny 37±0.1 ° C.Ocean Optics 355 DH-2000-BAL UV-Vis spectrophotometer (Halma PLC, Largo, FL, USA) dia nampiasaina mba hahazoana ny SPR toetra mampiavaka avy amin'ny UV-Vis hisakana ny fiasan'ireny spectra santionany amin'ny isan-karazany ny 250-800 nm.
Nandritra ny andrana iray manontolo, karazana fandrefesana telo samy hafa mifandraika amin'ny fahamarinan-toerana koloida no natao tamin'ny fotoana iray.Ampiasao ny DLS mba handrefesana ny savaivony hydrodynamic (Z salan'isa) sy ny mety ho zeta (ζ potentiel) amin'ny singa, satria ny salan'isa Z dia mifandray amin'ny salan'isan'ny aggregates nanoparticle, ary ny mety ho zeta dia manondro raha ny fandroahana electrostatic ao amin'ny rafitra. dia matanjaka ampy hanonerana ny fisintonana Van der Waals eo anelanelan'ny nanopartikely.Ny fandrefesana dia atao amin'ny triplicate, ary ny fivilian-dàlana mahazatra ny Z midika sy ny zeta mety dia kajy amin'ny rindrambaiko Zetasizer.Ny spectra SPR mampiavaka ny singa dia tombanana amin'ny alàlan'ny spectroscopy UV-Vis, satria ny fiovan'ny hamafin'ny tampony sy ny halavan'ny onjam-peo dia mety manondro ny fitambarana sy ny fifandraisana amin'ny tany.29,35 Raha ny marina, ny resonance plasmon surface amin'ny metaly sarobidy dia tena manan-danja tokoa ka nitarika fomba vaovao amin'ny famakafakana ny biomolecules.29,36,37 Ny fifantohana amin'ny AgNPs ao amin'ny fifangaroana andrana dia eo amin'ny 10 ppm, ary ny tanjona dia ny hametraka ny hamafin'ny haavon'ny SPR voalohany indrindra amin'ny 1. Ny fanandramana dia natao tamin'ny fotoana miankina amin'ny 0;1.5;3;6;12 sy 24 ora ao anatin'ny fepetra biolojika isan-karazany.Ny antsipiriany bebe kokoa momba ny fanandramana dia azo jerena ao amin'ny asantsika teo aloha.19 Raha fintinina, sanda pH isan-karazany (3; 5; 7.2 ary 9), klôro sodium samihafa (10 mM; 50 mM; 150 mM), glucose (3.9 mM; 6.7 mM) ary glutamine (4 mM), ary Nanomana ihany koa ny Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) sy ny Fetal Bovine Serum (FBS) (ao anaty rano sy DMEM) ho rafitra modely, ary nandinika ny fiantraikan'izy ireo amin'ny fitondran-tena fanangonana ny nanoparticles volafotsy synthesized.pH Ny sandan'ny, NaCl, glucose, ary glutamine dia tombanana mifototra amin'ny fifantohana ara-batana, fa ny habetsaky ny DMEM sy FBS dia mitovy amin'ny ambaratonga ampiasaina amin'ny fanandramana in vitro manontolo.38-42 Ny fandrefesana rehetra dia natao tamin'ny pH 7.2 sy 37 ° C miaraka amin'ny fatran'ny sira tsy tapaka amin'ny 10 mM NaCl mba hanafoanana ny fifampikasohana lavitr'ezaka (afa-tsy ny fanandramana mifandraika amin'ny pH sy NaCl, izay misy ireo toetra ireo fianarana).28 Ny lisitry ny fepetra isan-karazany dia fintinina ao amin'ny tabilao 1. Ny fanandramana voamarika amin'ny † dia ampiasaina ho fanondroana ary mifanandrify amin'ny santionany misy 10 mM NaCl sy pH 7.2.
Ny sela homamiadan'ny prostate olombelona (DU145) sy ny keratinocytes olombelona tsy mety maty (HaCaT) dia azo avy amin'ny ATCC (Manassas, VA, Etazonia).Ny cellules dia kolontsaina mahazatra ao amin'ny Eagle medium essentielle minimum (DMEM) ao Dulbecco misy glucose 4.5 g / L (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, Etazonia), ampiana 10% FBS, 2 mM L-glutamine, 0.01 % Streptomycin ary 0.005% Penicillin (Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, Etazonia).Ny sela dia kolontsaina ao amin'ny incubator 37 ° C ambanin'ny 5% CO2 sy ny hamandoana 95%.
Mba hijerena ny fiovan'ny cytotoxicity AgNP vokatry ny fivondronan'ny poti amin'ny fomba miankina amin'ny fotoana, dia natao ny fitiliana MTT dingana roa.Voalohany, ny fahafahan'ny karazana sela roa dia norefesina taorian'ny fitsaboana tamin'ny AgNP-I, AgNP-II ary AgNP-III.Ho an'ity tanjona ity, ireo karazana sela roa ireo dia nafafy tamin'ny takelaka 96-lavaka amin'ny hakitroky ny sela 10,000 / fantsakana ary nokarakaraina tamin'ny nanopartikely volafotsy telo samihafa amin'ny fitomboan'ny fifantohana amin'ny andro faharoa.Taorian'ny 24 ora fitsaboana, dia nosasana tamin'ny PBS ny sela ary natsofoka tamin'ny 0.5 mg / mL MTT reagent (SERVA, Heidelberg, Alemana) natsofoka tamin'ny kolontsaina nandritra ny 1 ora tamin'ny 37 ° C.Ny kristaly Formazan dia levona tao amin'ny DMSO (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, Etazonia), ary ny fisondrotana dia norefesina tamin'ny 570 nm tamin'ny fampiasana mpamaky takelaka Synergy HTX (BioTek-Hongria, Budapest, Hongria).Heverina ho 100% ny tahan'ny fahaveloman'ny santionany fanaraha-maso tsy voatsabo.Manaova andrana 3 farafahakeliny amin'ny fampiasana replika biolojika mahaleo tena efatra.Ny IC50 dia kajy avy amin'ny curve valin'ny fatra mifototra amin'ny valin'ny fahavelomana.
Avy eo, amin'ny dingana faharoa, amin'ny alàlan'ny fanindronana ny poti amin'ny 150 mM NaCl mandritra ny vanim-potoana samihafa (0, 1.5, 3, 6, 12, ary 24 ora) alohan'ny fitsaboana sela, dia novokarina ny fanjakana aggregation samihafa amin'ny nanoparticles volafotsy.Taorian'izay dia natao ny fitiliana MTT mitovy amin'ny voalaza teo aloha mba hanombanana ny fiovan'ny fahaveloman'ny sela misy fiantraikany amin'ny fitambaran'ny singa.Ampiasao ny GraphPad Prism 7 hanombanana ny vokatra farany, kajy ny lanjan'ny statistika amin'ny fanandramana amin'ny t-test tsy misy mpivady, ary mariho ny haavony ho * (p ≤ 0.05), ** (p ≤ 0.01), *** (p ≤ 0.001 ) Ary **** (p ≤ 0,0001).
Nanoparticles volafotsy telo samy hafa (AgNP-I, AgNP-II ary AgNP-III) no nampiasaina ho an'ny antibakteria mora voan'ny Cryptococcus neoformans IFM 5844 (IFM; Foibem-pikarohana ho an'ny holatra pathogen sy microbial Toxicology, Chiba University) ary Bacillus Test megaterium SZMC 6031 (SZMC: Szeged Microbiology Collection) sy E. coli SZMC 0582 amin'ny RPMI 1640 medium (Sigma-Aldrich Co.).Mba hanombanana ny fiovan'ny hetsika antibacterial vokatry ny fitambaran'ny singa, voalohany indrindra, ny fatran'ny inhibitory ambany indrindra (MIC) dia nofaritana tamin'ny alàlan'ny microdilution ao anaty takelaka microtiter 96-well.Amin'ny 50 μL amin'ny fampiatoana sela manara-penitra (5 × 104 sela / mL amin'ny RPMI 1640 antonony), ampio 50 μL ny fampiatoana nanoparticle volafotsy ary manalefaka avo roa heny ny fifantohana (ao amin'ny medium voalaza etsy ambony, ny isan-karazany dia 0 sy 75 ppm, izany hoe, Ny santionan'ny fanaraha-maso dia misy 50 μL ny fampiatoana sela ary 50 μL ny antonony tsy misy nanoparticles).Taorian'izay, ny takelaka dia natsipy tao amin'ny 30 ° C nandritra ny 48 ora, ary ny hakitroky ny kolontsaina dia refesina amin'ny 620 nm amin'ny fampiasana mpamaky takelaka SPECTROstar Nano (BMG LabTech, Offenburg, Germany).Natao in-telo tamin'ny triplicate ny andrana.
Afa-tsy ny 50 μL ny santionany nanoparticle tokana no nampiasaina tamin'io fotoana io, ny fomba fiasa mitovy amin'ny voalaza teo aloha dia nampiasaina mba handinihana ny fiantraikan'ny fanangonana amin'ny hetsika antibacterial amin'ireo tsipika voalaza etsy ambony.Ny fanjakana aggregation isan-karazany amin'ny nanopartikely volafotsy dia novokarina tamin'ny alàlan'ny fampidirana ireo singa amin'ny 150 mM NaCl mandritra ny vanim-potoana samihafa (0, 1.5, 3, 6, 12, ary 24 ora) alohan'ny fanodinana sela.Ny fampiatoana nampiana 50 μL an'ny RPMI 1640 medium dia nampiasaina ho fanaraha-maso ny fitomboana, raha mba hifehezana ny poizina dia nampiasaina ny fampiatoana miaraka amin'ny nanopartikel tsy mitambatra.Natao in-telo tamin'ny triplicate ny andrana.Ampiasao ny GraphPad Prism 7 hanombanana indray ny vokatra farany, amin'ny fampiasana ny famakafakana statistika mitovy amin'ny famakafakana MTT.
Ny haavon'ny fitambaran'ny singa kely indrindra (AgNP-I) dia voamarika, ary ny vokatra dia navoaka tamin'ny ampahany tamin'ny asantsika teo aloha, fa ho an'ny fampitahana tsara kokoa, ny singa rehetra dia nodinihina tsara.Ny angona andrana dia angonina sy resahina ao amin'ny fizarana manaraka.Ireo singa mifandraika amin'ny AgNP.19
Ny fandrefesana nataon'ny TEM, UV-Vis ary DLS dia nanamarina ny fahombiazan'ny santionany AgNP rehetra (sary 2A-D).Araka ny andalana voalohany amin'ny sary 2, ny ampahany kely indrindra (AgNP-I) dia mampiseho morphologie spherical fanamiana misy savaivony eo ho eo amin'ny 10 nm.Ny fomba fitomboan'ny voa ihany koa dia manome AgNP-II sy AgNP-III miaraka amin'ny habe samihafa miaraka amin'ny savaivony salan'isa eo amin'ny 20 nm sy 50 nm.Araka ny fivilian-dàlana manara-penitra amin'ny fizarana sombintsombiny dia tsy mifanipaka ny haben'ireo santionany telo, izay zava-dehibe amin'ny famakafakana fampitahana.Amin'ny fampitahana ny salan'isa aspect ratio sy ny thinness ratio amin'ny TEM-based particle 2D projections, dia heverina fa ny sphericity of the particles dia tombanan'ny ImageJ's shape filter plug-in (sary 2E).43 Araka ny famakafakana ny endrik'ireo singa, dia tsy misy fiantraikany amin'ny fitomboan'ny potiny ny aspect ratio (lafy lehibe/fohy amin'ny mahitsizoro faran'izay kely indrindra), ary ny taham-pahamaniny (faritra refesina amin'ny faribolana tonga lafatra mifanitsy amin'ny faritra teorika. ) mihena tsikelikely.Izany dia miteraka potika polyhedral bebe kokoa, izay boribory tanteraka amin'ny teoria, mifanandrify amin'ny tahan'ny manify 1.
Sary 2 Ny sary (A), ny diffraction electron (ED) (B), ny histograma fitsinjarana ny habeny (C), ny taratra ultraviolet (UV-Vis) hita maso (UV-Vis) tara-pahazavana (D), ary ny fluid Citrate. Ny nanopartikely volafotsy voafaritry ny savaivony mekanika (Z-average), ny mety ho zeta, ny aspect ratio ary ny hatevin'ny (E) dia manana habe telo samihafa: AgNP-I dia 10 nm (lahatra ambony), AgNP -II dia 20 nm (laharana afovoany). ), AgNP-III (lahatra ambany) dia 50 nm.
Na dia misy fiantraikany amin'ny endriky ny ampahany aza ny toetran'ny cyclic amin'ny fomba fitomboana, ka nahatonga ny sphericity kely kokoa amin'ny AgNPs lehibe kokoa, dia nijanona quasi-spherical avokoa ny santionany telo.Fanampin'izany, araka ny aseho amin'ny lamina diffraction elektronika ao amin'ny Figure 2B, nano Tsy misy fiantraikany amin'ny kristaly ny singa.Ny peratra diffraction malaza-izay azo ampifandraisina amin'ny (111), (220), (200), ary (311) Miller indices volafotsy-dia tena mifanaraka amin'ny literatiora siantifika sy ny fandraisantsika teo aloha.9, 19,44 Ny fizarazaran'ny peratra Debye-Scherrer an'ny AgNP-II sy AgNP-III dia noho ny zava-misy fa ny sary ED dia voasambotra amin'ny fampitomboana mitovy, ka rehefa mitombo ny haben'ny poti, ny isan'ny singa samihafa isaky ny mitombo sy mihena ny velaran'ny tarika .
Ny habeny sy ny endriky ny nanopartikel dia fantatra fa misy fiantraikany amin'ny asa biolojika.3,45 Ny hetsika catalytika sy biolojika miankina amin'ny endrika dia azo hazavaina amin'ny zava-misy fa ny endrika samihafa dia mihamitombo ny endrika kristaly sasany (manana indices Miller samihafa), ary ireo endrika kristaly ireo dia manana hetsika samihafa.45,46 Koa satria ireo singa voaomana dia manome vokatra mitovy amin'ny ED mifanaraka amin'ny toetran'ny kristaly tena mitovy, dia azo heverina fa amin'ny fitoniana colloidal manaraka sy ny fanandramana biolojika, ny fahasamihafana hita dia tokony ho lazaina amin'ny haben'ny Nanoparticle, fa tsy ny fananana mifandraika amin'ny endrika.
Ny valin'ny UV-Vis voafintina ao amin'ny Figure 2D dia manantitrantitra bebe kokoa ny toetran'ny spherical be dia be amin'ny AgNP voarafitra, satria ny tampon'ny SPR amin'ny santionany telo dia manodidina ny 400 nm, izay sanda mampiavaka ny nanoparticles volafotsy spherical.29,30 Ny spectra voasambotra koa dia nanamafy ny fitomboan'ny nanosilver amin'ny voa.Rehefa mitombo ny haben'ny sombin-javatra, ny halavan'ny onjam-pandrefesana mifanaraka amin'ny fisondrotry ny hazavana ambony indrindra amin'ny AgNP-II-miharihary kokoa-Araka ny literatiora, AgNP-III dia niaina fiovana mena.6,29
Momba ny fahamarinan-toerana koloidal voalohany ny rafitra AgNP, DLS dia nampiasaina mba handrefesana ny salan'isa hydrodynamic savaivony sy ny zeta mety ny poti amin'ny pH 7.2.Ny valiny aseho ao amin'ny Figure 2E dia mampiseho fa ny AgNP-III dia manana fitoniana colloidal ambony kokoa noho ny AgNP-I na AgNP-II, satria ny torolàlana mahazatra dia manondro fa ny zeta mety amin'ny 30 mV absolute dia ilaina amin'ny fitoniana colloidal maharitra. ny sandan'ny Z salantsalany (azo ho toy ny savaivony hydrodynamic salan'isa malalaka sy aggregate) dia ampitahaina amin'ny haben'ny singa voalohany azon'ny TEM, satria ny akaiky kokoa ny soatoavina roa, ny maivana kokoa ny mari-pahaizana Miangona ao amin'ny santionany.Raha ny marina, ny salan'isa Z an'ny AgNP-I sy AgNP-II dia avo kokoa noho ny haben'ny ampahany lehibe indrindra amin'ny TEM-tomban'izy ireo, ka raha oharina amin'ny AgNP-III, ireo santionany ireo dia voalaza fa mety hitambatra kokoa, izay misy ny mety ho zeta ratsy indrindra. dia miaraka amin'ny habe akaiky Ny sandan'ny Z eo ho eo.
Ny fanazavana momba ity tranga ity dia mety ho roa sosona.Amin'ny lafiny iray, ny fifantohana amin'ny citrate dia tazonina amin'ny ambaratonga mitovy amin'ny dingana synthesis rehetra, izay manome vondron'olona ambony voampanga be dia be mba hisorohana ny fihenan'ny faritra manokana amin'ireo singa mitombo.Na izany aza, araka ny voalazan'i Levak et al., ny molekiola kely toy ny citrate dia azo takalon'ny biomolekule eo ambonin'ny nanopartikely.Amin'ity tranga ity, ny fahamarinan'ny colloidal dia hofaritan'ny corona amin'ny biomolekulina vokarina.31 Satria io fihetsika io dia hita ihany koa tamin'ny fandrefesana aggregation ataontsika (izay resahina amin'ny antsipiriany bebe kokoa any aoriana), ny citrate capping irery dia tsy afaka manazava izany tranga izany.
Amin'ny lafiny iray, ny haben'ny poti dia mifanipaka amin'ny fironan'ny fanangonana amin'ny haavon'ny nanometer.Izany no tena tohanan'ny fomba nentim-paharazana Derjaguin-Landau-Verwey-Overbeek (DLVO), izay faritana ho fitambaran'ny hery manintona sy maharikoriko eo amin'ireo singa.Araka ny voalazan'i He et al., dia mihena ny sanda ambony indrindra amin'ny curve angovo DLVO miaraka amin'ny haben'ny nanoparticles ao amin'ny hematite nanoparticles, ka mahatonga azy io ho mora kokoa ny hahatratra ny angovo voalohany ambany indrindra, ka hampiroborobo ny fanangonana tsy azo ovaina (condensation).47 Na izany aza, heverina fa misy lafiny hafa ankoatra ny fetran'ny teoria DLVO.Na dia mitovitovy amin'ny fitomboan'ny haben'ny poti-javatra aza ny gravity van der Waals sy ny fanodikodinana roa sosona electrostatika, ny famerenana nataon'i Hotze et al.dia manolo-kevitra fa misy fiantraikany mahery kokoa amin'ny fanangonam-bokatra noho ny avelan'ny DLVO.14 Mino izy ireo fa ny curvature ambonin'ny nanoparticles dia tsy azo tombanana ho fisaka intsony, ka mahatonga ny fanombanana matematika tsy azo ampiharina.Fanampin'izany, rehefa mihena ny haben'ny poti, dia mihamitombo ny isan-jaton'ny atôma eo amin'ny tany, izay mitarika ho amin'ny rafitra elektronika sy ny fitondran-tena momba ny fiampangana.Ary miova ny fihetsiky ny ety ambonin'ny tany, izay mety hitarika amin'ny fihenan'ny fiampangana ao amin'ny sosona elektrika roa sosona ary hampiroborobo ny fanangonana.
Raha ampitahaina ny valin'ny DLS an'ny AgNP-I, AgNP-II, ary AgNP-III ao amin'ny Figure 3, dia nahatsikaritra izahay fa ny santionany telo dia nampiseho pH mitovy amin'izany.Ny tontolo iainana misy asidra be (pH 3) dia mamindra ny tanjaky ny zeta amin'ny santionany ho 0 mV, ka mahatonga ny poti hamorona fitambarana mirefy micron, fa ny pH alkaline kosa dia mamindra ny tanjaky ny zeta ho amin'ny sanda ratsy lehibe kokoa, izay mahatonga ny poti-javatra mitambatra kely kokoa (pH 5). ).Ary 7.2) ), na mijanona tsy mitambatra tanteraka (pH 9).Voamarika ihany koa ny fahasamihafana lehibe eo amin'ireo santionany samihafa.Nandritra ny andrana, AgNP-I no tena saro-pady indrindra amin'ny fiovan'ny zeta azo avy amin'ny pH, satria nihena ny tanjaky ny zeta amin'ireo singa ireo amin'ny pH 7.2 raha oharina amin'ny pH 9, raha toa kosa ny AgNP-II sy AgNP-III dia tsy nampiseho afa-tsy A. fiovana lehibe ao amin'ny ζ dia manodidina ny pH 3. Ankoatra izany, ny AgNP-II dia nampiseho fiovana miadana kokoa sy mety ho zeta antonony, raha ny AgNP-III kosa dia nampiseho ny fitondran-tena malemy indrindra amin'ny telo, satria ny rafitra dia nampiseho ny sanda zeta avo indrindra sy ny hetsika fironana miadana, izay manondro AgNP-III Mahatohitra indrindra amin'ny fivondronan'ny pH.Ireo vokatra ireo dia mifanaraka amin'ny valin'ny fandrefesana savaivony hydrodynamic.Raha jerena ny haben'ny ampahany amin'ny primers, ny AgNP-I dia nampiseho fivondronana miandalana tsy tapaka amin'ny sanda pH rehetra, azo inoana fa noho ny fiaviana 10 mM NaCl, raha toa kosa ny AgNP-II sy AgNP-III dia tsy nampiseho afa-tsy tamin'ny pH 3 amin'ny fanangonana.Ny fahasamihafana mahaliana indrindra dia ny hoe na dia eo aza ny haben'ny nanoparticle lehibe, ny AgNP-III dia mamorona ny fitambarana kely indrindra amin'ny pH 3 ao anatin'ny 24 ora, manasongadina ny toetrany manohitra ny fanangonam-bokatra.Amin'ny fizarana ny salan'isa Z an'ny AgNPs amin'ny pH 3 aorian'ny 24 ora amin'ny sandan'ny santionany voaomana, dia azo jerena fa ny haben'ny fitambaran'ny AgNP-I sy AgNP-II dia nitombo in-50, in-42, ary in-22. , tsirairay avy.III.
Figure 3 Ny vokatry ny fanaparitahana hazavana mavitrika amin'ny santionany nanoparticles volafotsy vita amin'ny citrate miaraka amin'ny habeny mitombo (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II ary 50 nm: AgNP-III) dia aseho ho toy ny savaivony hydrodynamic (Z salan'isa). ) (ankavanana) Ao anatin'ny fepetra pH samihafa, miova ao anatin'ny 24 ora ny mety ho zeta (ankavia).
Ny fitambarana miankina amin'ny pH voamarika ihany koa dia nisy fiantraikany tamin'ny resonance plasmon surface (SPR) amin'ny santionany AgNP, araka ny asehon'ny spectra UV-Vis.Araka ny sary fanampiny S1, ny fitambaran'ireo fampiatoana nanoparticle volafotsy telo dia arahin'ny fampihenana ny hamafin'ny tampon'izy ireo SPR sy ny fiovan'ny mena antonony.Ny halehiben'ireo fiovana ireo amin'ny asan'ny pH dia mifanaraka amin'ny haavon'ny fitambarana nambaran'ny valin'ny DLS, na izany aza, misy fironana mahaliana sasany hita.Mifanohitra amin'ny intuition, hita fa ny AgNP-II midadasika no tena saro-pady indrindra amin'ny fiovan'ny SPR, fa ny santionany roa hafa dia tsy dia saro-pady.Ao amin'ny fikarohana SPR, 50 nm no fetran'ny haben'ny poti-teorika, izay ampiasaina hanavahana ny singa mifototra amin'ny toetrany dielectric.Ny potikely kely kokoa noho ny 50 nm (AgNP-I sy AgNP-II) dia azo lazaina ho dipole dielectric tsotra, fa ny poti izay mahatratra na mihoatra io fetra io (AgNP-III) dia manana fananana dielectric sarotra kokoa, ary ny resonance dia mizara ho fiovana maro ny tarika. .Raha misy santionany roa kely kokoa, ny AgNPs dia azo raisina ho dipoles tsotra, ary ny plasma dia mora mifanipaka.Rehefa mihamitombo ny haben'ny poti-javatra, dia mamokatra plasma lehibe kokoa io fampifangaroana io, izay mety hanazava ny fahatsapan-tena ambony kokoa.29 Na izany aza, ho an'ny singa lehibe indrindra, ny tombantomban'ny dipole tsotra dia tsy manan-kery rehefa mety hitranga ihany koa ny fanjakana hafa, izay afaka manazava ny fihenan'ny AgNP-III mba hanondroana ny fiovan'ny spectral.29
Eo ambanin'ny fepetra andrana ataontsika, dia voaporofo fa misy fiantraikany lalina eo amin'ny fahamarinan-toerana koloidal ny nanopartikely volafotsy misy citrate misy habe ny sandan'ny pH.Ao anatin'ireo rafitra ireo, ny fitoniana dia omen'ny vondrona -COO- miiba ratsy eo ambonin'ny AgNPs.Ny vondrona miasa carboxylate ny citrate ion dia protonated amin'ny maro H + ion, ka ny vondrona carboxyl niteraka tsy afaka manome electrostatic repulsion eo amin'ny poti intsony, araka ny hita eo amin'ny laharana ambony amin'ny Figure 4. Araka ny fitsipiky ny Le Chatelier, AgNP ny santionany dia miangona haingana amin'ny pH 3, saingy mihamitombo tsikelikely rehefa mitombo ny pH.
Sary 4 Mekanisma skéma amin'ny fifaneraserana amin'ny ety ambonin'ny tany voafaritry ny fitambarana eo ambanin'ny pH samihafa (andalana ambony), ny fifantohan'ny NaCl (andalana afovoany), ary ny biomolekulina (andalana ambany).
Araka ny sary 5, ny fahamarinan-toerana colloidal amin'ny fampiatoana AgNP amin'ny habe samihafa dia nodinihina ihany koa noho ny fitomboan'ny fifantohana sira.Miorina amin'ny mety ho zeta, ny fitomboan'ny haben'ny nanoparticle ao amin'ireo rafitra AgNP citrate-terminated indray dia manome fanoherana bebe kokoa amin'ny fitaomana ivelany avy amin'ny NaCl.Ao amin'ny AgNP-I, ny 10 mM NaCl dia ampy hanentanana ny fanangonana malefaka, ary ny fifantohana sira amin'ny 50 mM dia manome vokatra mitovy.Ao amin'ny AgNP-II sy AgNP-III, 10 mM NaCl dia tsy misy fiantraikany be amin'ny mety ho zeta satria mijanona ao amin'ny (AgNP-II) na ambany (AgNP-III) -30 mV ny sandany.Ny fampitomboana ny fifantohana NaCl amin'ny 50 mM ary farany amin'ny 150 mM NaCl dia ampy hampihenana ny sandan'ny zeta tanteraka amin'ny santionany rehetra, na dia mitazona fiampangana ratsy kokoa aza ny singa lehibe kokoa.Ireo vokatra ireo dia mifanaraka amin'ny savaivony hydrodynamic antenaina amin'ny AgNPs;ny tsipika fironana Z eo ho eo refesina amin'ny 10, 50, ary 150 mM NaCl dia mampiseho ny sanda samihafa, mitombo tsikelikely.Farany, hita tamin'ny andrana telo 150 mM ny fitambaran'ny micron.
Figure 5 Ny vokatry ny fanaparitahana hazavana mavitrika amin'ny santionany nanoparticles volafotsy vita amin'ny citrate miaraka amin'ny habeny mitombo (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II ary 50 nm: AgNP-III) dia aseho ho ny savaivony hydrodynamic (Z salan'isa). ) (ankavanana) sy ny mety ho zeta (ankavia) dia miova ao anatin'ny 24 ora eo ambanin'ny fifantohana NaCl samihafa.
Ny valin'ny UV-Vis amin'ny sary fanampiny S2 dia mampiseho fa ny SPR amin'ny 50 sy 150 mM NaCl amin'ny santionany telo dia manana fihenam-bidy eo noho eo sy lehibe.Izany dia azo hazavain'ny DLS, satria ny fanangonana mifototra amin'ny NaCl dia mitranga haingana kokoa noho ny fanandramana miankina amin'ny pH, izay hazavain'ny fahasamihafana lehibe eo amin'ny fandrefesana voalohany (0, 1.5, ary 3 ora).Fanampin'izany, ny fampitomboana ny fatran'ny sira dia hampitombo ihany koa ny fahafahan'ny fitaovana fanandramana, izay hisy fiantraikany lalina eo amin'ny resonance plasmon surface.29
Ny vokatry ny NaCl dia fintinina eo amin'ny laharana afovoany amin'ny Figure 4. Amin'ny ankapobeny dia azo tsoahina fa ny fampitomboana ny fifantohana amin'ny klôro sodium dia misy fiantraikany mitovy amin'ny fampitomboana ny asidra, satria ny ion Na + dia manana fironana hirindra manodidina ny vondrona carboxylate, manafoana ny AgNPs mety ho zeta ratsy.Fanampin'izany, ny 150 mM NaCl dia namokatra aggregates micron amin'ny santionany telo, izay manondro fa ny fifantohana electrolyte ara-batana dia manimba ny fahamarinan'ny colloidal ny AgNPs citrate.Amin'ny fandinihana ny fifantohana mivaingana (CCC) an'ny NaCl amin'ny rafitra AgNP mitovy amin'izany, dia azo apetraka amin'ny literatiora mifandraika amin'izany ireo valiny ireo.Huynh et al.dia nanao kajy fa ny CCC an'ny NaCl ho an'ny nanoparticles volafotsy vita amin'ny citrate miaraka amin'ny savaivony 71 nm dia 47.6 mM, raha El Badawy et al.dia nanamarika fa ny CCC an'ny 10 nm AgNPs misy citrate coating dia 70 mM.10,16 Ankoatr'izay, ny CCC avo be eo amin'ny 300 mM dia norefesiny He et al., izay nahatonga azy ireo ho hafa noho ny famoahana voalaza teo aloha.48 Na dia tsy mikendry ny famakafakana feno momba ireo soatoavina ireo aza ny fandraisana anjara amin'izao fotoana izao, satria mihamitombo ny fepetra andrana ataontsika amin'ny fahasarotan'ny fandalinana iray manontolo, ny fifantohana biolojika mifandraika amin'ny NaCl 50 mM, indrindra fa ny 150 mM NaCl, dia toa avo be.Induced coagulation, manazava ny fiovana mahery hita.
Ny dingana manaraka amin'ny andrana polymerization dia ny fampiasana molekiola tsotra nefa manan-danja amin'ny biolojika mba hanahafana ny fifandraisana amin'ny nanoparticle-biomolecule.Miorina amin'ny DLS (sary 6 sy 7) sy ny valin'ny UV-Vis (sary fanampiny S3 sy S4), azo asongadina ny fehin-kevitra ankapobeny.Eo ambanin'ny fepetra andrana ataontsika, ny molekiola gliokaozy sy glutamine nodinihina dia tsy hamporisika ny fivondronana amin'ny rafitra AgNP rehetra, satria ny fironana Z-mean dia mifandray akaiky amin'ny sandan'ny fandrefesana reference.Na dia tsy misy fiantraikany amin'ny fanangonana aza ny fisian'izy ireo, ny valin'ny fanandramana dia mampiseho fa ireo molekiola ireo dia mipetaka amin'ny ampahany amin'ny AgNPs.Ny vokatra misongadina indrindra manohana an'io fomba fijery io dia ny fiovana hita eo amin'ny fisoronana hazavana.Na dia tsy mampiseho ny halavan'ny onjam-peo na ny hamafin'ny fiovana aza ny AgNP-I, dia azo jerena mazava kokoa izany amin'ny fandrefesana ireo poti-javatra lehibe kokoa, izay azo inoana fa noho ny fahatsapana optika lehibe kokoa voalaza teo aloha.Na inona na inona fifantohana, ny glucose dia mety miteraka fiovana mena lehibe kokoa aorian'ny 1.5 ora raha oharina amin'ny fandrefesana fanaraha-maso, izay manodidina ny 40 nm ao amin'ny AgNP-II ary eo amin'ny 10 nm ao amin'ny AgNP-III, izay manaporofo ny fisian'ny fifandraisana amin'ny tany.Naneho fironana mitovy amin'izany ny glutamine, saingy tsy dia hita loatra ny fiovana.Ankoatr'izay dia ilaina ihany koa ny manamarika fa ny glutamine dia afaka mampihena ny mety ho zeta tanteraka amin'ny singa antonony sy lehibe.Na izany aza, satria toa tsy misy fiantraikany amin'ny haavon'ny fanangonam-bokatra ireo fiovana ireo, dia azo heverina fa na ny biôlôlôla kely toy ny glutamine aza dia afaka manome halehiben'ny fandroahana ara-potoana eo amin'ny singa.
Figure 6 Ny valin'ny fanaparitahana hazavana mavitrika amin'ny santionany nanoparticle volafotsy vita amin'ny citrate miaraka amin'ny habeny mitombo (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II ary 50 nm: AgNP-III) dia aseho amin'ny savaivony hydrodynamic (Z salan'isa) (ankavanana) Ao anatin'ny toe-javatra ivelany amin'ny fatran'ny glucose samihafa, miova ao anatin'ny 24 ora ny mety ho zeta (ankavia).
Figure 7 Ny vokatry ny fanaparitahana hazavana mavitrika amin'ny santionany nanoparticles volafotsy vita amin'ny citrate miaraka amin'ny habeny mitombo (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II ary 50 nm: AgNP-III) dia aseho amin'ny savaivony hydrodynamic (Z salan'isa). ) (ankavanana) Raha misy glutamine dia miova ao anatin'ny 24 ora ny mety ho zeta (ankavia).
Raha fintinina, ny biôlôlôlôjia kely toy ny glucose sy ny glutamine dia tsy misy fiantraikany amin'ny fahamarinan-toeran'ny colloidal amin'ny fifantohana refesina: na dia misy fiantraikany amin'ny mety ho zeta sy ny vokatra UV-Vis amin'ny ambaratonga samihafa aza, ny vokatra Z eo ho eo dia tsy mifanaraka.Izany dia manondro fa ny adsorption ambonin'ny molekiola manakana electrostatic repulsion, fa miaraka amin'izay koa, manome fahamarinan-toerana dimensional.
Mba hampifandraisana ny vokatra teo aloha amin'ny vokatra teo aloha sy hanahafana ny toe-javatra biolojika kokoa, dia nisafidy ny sasany amin'ireo singa kolontsaina sela fampiasa matetika izahay ary nampiasa azy ireo ho fepetra andrana amin'ny fandalinana ny fahamarinan'ny koloid AgNP.Ao amin'ny fanandramana in vitro manontolo, ny iray amin'ireo asa manan-danja indrindra amin'ny DMEM amin'ny maha-mpanelanelana azy dia ny fametrahana ny fepetra osmotika ilaina, fa avy amin'ny fomba fijery simika, dia vahaolana sira be pitsiny miaraka amin'ny tanjaky ionic manontolo mitovy amin'ny 150 mM NaCl. .40 Raha ny FBS, dia fifangaroan'ny biôlôlôla saro-pady-indrindra indrindra ny proteinina-avy amin'ny fomba fijery adsorption ambonin'ny tany, misy itovizana amin'ny vokatry ny andrana amin'ny glucose sy glutamine, na dia eo aza ny firafitry ny simika sy ny fahasamihafana dia sarotra kokoa ny firaisana ara-nofo.19 DLS sy UV-Ny vokatra hita hita ao amin'ny sary 8 sy ny fanampiny S5, tsirairay avy, dia azo hazavaina amin'ny fandinihana ny firafitry ny simika amin'ireo fitaovana ireo ary mampifandray azy ireo amin'ny fandrefesana ao amin'ny fizarana teo aloha.
Figure 8 Ny vokatry ny fanaparitahana hazavana mavitrika amin'ny santionan'ny nanoparticles volafotsy vita amin'ny citrate miaraka amin'ny habeny mitombo (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II ary 50 nm: AgNP-III) dia aseho amin'ny savaivony hydrodynamic (Z salan'isa). ) (ankavanana) Eo anatrehan'ny singa kolontsaina sela DMEM sy FBS, ny zeta potential (ankavia) dia miova ao anatin'ny 24 ora.
Ny fandotoana ny AgNPs amin'ny habe samihafa ao amin'ny DMEM dia misy fiantraikany mitovy amin'ny fahamarinan'ny colloidal amin'ny fahitana ny fisian'ny NaCl avo lenta.Ny fanaparitahana ny AgNP ao amin'ny 50 v / v% DMEM dia nampiseho fa ny fitambarana lehibe dia hita tamin'ny fitomboan'ny zeta mety sy ny sanda Z-salan'isa ary ny fihenan'ny haavon'ny SPR.Tsara ny manamarika fa ny haben'ny fitambarana ambony indrindra ateraky ny DMEM aorian'ny 24 ora dia mifanohitra amin'ny haben'ny nanopartikely voalohany.
Ny fifandraisana misy eo amin'ny FBS sy AgNP dia mitovy amin'ny hita amin'ny fisian'ny molekiola kely kokoa toy ny glucose sy glutamine, saingy mahery kokoa ny vokany.Ny salan'isa Z amin'ny singa dia tsy misy fiantraikany, raha toa ka hita ny fitomboan'ny zeta.Ny tampon'ny SPR dia nampiseho fiovana mena kely, fa angamba mahaliana kokoa, ny hamafin'ny SPR dia tsy nihena be toy ny tamin'ny fandrefesana fanaraha-maso.Ireo vokatra ireo dia azo hazavaina amin'ny alàlan'ny adsorption voajanahary amin'ny macromolecules eo amin'ny tontolon'ny nanoparticles (andalana ambany ao amin'ny Figure 4), izay fantatra ankehitriny ho fananganana corona biomolecular ao amin'ny vatana.49