جاواسکریپټ اوس مهال ستاسو په براوزر کې غیر فعال دی.کله چې جاوا سکرپٹ غیر فعال وي، د دې ویب پاڼې ځینې دندې به کار ونکړي.
خپل ځانګړي توضیحات او د ګټو ځانګړي درمل راجستر کړئ، او موږ به هغه معلومات چې تاسو یې زموږ په پراخه ډیټابیس کې د مقالو سره چمتو کوئ سره سمون خوري او تاسو ته به په وخت سره د بریښنالیک له لارې د PDF کاپي واستوو.
ایا کوچني نانو ذرات تل غوره دي؟د بیولوژیکي پلوه اړوند شرایطو لاندې د سپینو زرو نانو ذراتو د اندازې پورې تړلي راټولولو بیولوژیکي اغیزې درک کړئ
لیکوالان: Bélteky P، Rónavári A، Zakupszky D، Boka E، Igaz N، Szerencsés B، Pfeiffer I، Vágvölgyi C، Kiricsi M، Kónya Z
پیټر بیلټیکي، 1، اندریا روناوري، 1، دالما زاکوپسزکي، 1 ایسټر بوکا، 1 نورا ایګاز، 2 بیتینا سیرینسیس، 3 ایلونا فیفر، 3 سیبا واګولګی، 3 مونیکا کریسی د چاپیریال د کیمیا او ساینس پوهنځی د ساینس پوهنځی، د سیزګیډ پوهنتون2 د بایو کیمیا او مالیکولر بیولوژي څانګه، د ساینس او ​​​​معلوماتو پوهنځی، د زیګډ پوهنتون، هنګري؛3 د مایکروبیولوژي څانګه، د ساینس او ​​​​معلوماتو پوهنځی، د زیګډ پوهنتون، هنګري؛4MTA-SZTE عکس العمل کایناتیک او د سطحی کیمیا څیړنیز ګروپ، سیزګډ، هنګري* دې لیکوالانو په دې کار کې په مساوي توګه مرسته کړې.اړیکه: د تطبیق او چاپیریال کیمیا د Zoltán Kónya ډیپارټمنټ، د ساینس او ​​​​معلوماتو پوهنځی، د سیزګیډ پوهنتون، ریریچ مربع 1، سیزګډ، H-6720، هنګري تلیفون + 36 62 544620 بریښنالیک [د بریښنالیک محافظت] موخه: د سلور نانو پارټیکل دي یو له خورا عام مطالعه شوي نانوومیټریالونو څخه ، په ځانګړي توګه د دوی د بایو میډیکل غوښتنلیکونو له امله.په هرصورت، د نانو ذراتو د راټولولو له امله، د دوی غوره سایتټوکسیکیت او انټي باکتریا فعالیت اکثرا په بیولوژیکي رسنیو کې جوړجاړی کیږي.په دې کار کې، د 10، 20، او 50 nm اوسط قطر سره د درې مختلف سیټریټ ختم شوي سپینو زرو نانو پارټیکل نمونو د راټولولو چلند او اړوند بیولوژیکي فعالیتونه مطالعه شوي.طریقه: د نانو ذرات ترکیب او ځانګړتیا لپاره د لیږد بریښنایی مایکروسکوپ وکاروئ ، د مختلف pH ارزښتونو ، NaCl ، ګلوکوز او ګلوټامین غلظت کې د متحرک ر lightا توزیع او الټرا وایلیټ لید سپیکٹروسکوپي په واسطه د دوی د راټولولو چلند ارزونه وکړئ.برسېره پردې، په حجرو کې د کلتور منځنۍ برخې لکه Dulbecco په Eagle Medium او Fetal Calf Serum کې د راټولولو چلند ښه کوي.پایلې: پایلې ښیي چې اسیدیک pH او فیزولوژیکي الکترولیت مواد عموما د مایکرون پیمانه راټولول هڅوي، کوم چې د بایومولیکولر کورونا په جوړولو کې منځګړیتوب کیدی شي.د یادولو وړ ده چې لوی ذرات د خپلو کوچنیو سیالانو په پرتله د بهرنیو تاثیراتو په وړاندې لوړ مقاومت څرګندوي.د ویټرو سایټوټوکسیت او انټي باکتریا ازموینې په مختلف راټولولو مرحلو کې د نانو پارټیکل مجموعو سره د حجرو درملنې سره ترسره شوي.پایله: زموږ پایلې د کولایډیل ثبات او د AgNPs زهرجنیت تر مینځ ژور اړیکه څرګندوي ، ځکه چې خورا ډیر راټولول د بیولوژیکي فعالیت بشپړ ضایع کیدو لامل کیږي.د لویو ذراتو لپاره د راټولولو ضد لوړه درجه د ویټرو زهرجنیت باندې د پام وړ اغیزه لري، ځکه چې دا ډول نمونې ډیر انټي مایکروبیل او د تی لرونکو حجرو فعالیت ساتي.دا موندنې دې پایلې ته رسوي چې په اړونده ادبیاتو کې د عمومي نظر سره سره، د ممکنه کوچنیو نانو ذراتو په نښه کول ممکن د عمل غوره لاره نه وي.کلیدي کلمې: د تخم منځګړیتوب وده، د کولایډیل ثبات، د اندازې پورې تړلی راټولولو چلند، د مجموعې زیان زهرجن
لکه څنګه چې د نانومیټریال تقاضا او تولید دوام لري، د دوی بیولوژیکي فعالیت یا بیولوژیکي فعالیت ته ډیره پاملرنه کیږي.د سپینو زرو نانو ذرات (AgNPs) د دې ټولګي موادو ترټولو عام ترکیب شوي ، څیړل شوي او کارول شوي نمایندګان دي ځکه چې د دوی عالي کتلیتیک ، نظری او بیولوژیکي ملکیتونو له امله.1 عموما داسې انګیرل کیږي چې د نانو موادو ځانګړي ځانګړتیاوې (د AgNPs په شمول) په عمده توګه د دوی لوی ځانګړي سطحې ساحې ته منسوب شوي.له همدې امله، حتمي ستونزه هر هغه پروسه ده چې دا کلیدي ځانګړتیا اغیزه کوي، لکه د ذرې اندازه، د سطحې پوښښ یا جمع کول، ایا دا به د نانو ذراتو ملکیتونو ته سخت زیان ورسوي چې د ځانګړو غوښتنلیکونو لپاره مهم دي.
د ذرې اندازه او ثبات اغیزې هغه مضامین دي چې په ادب کې نسبتا ښه مستند شوي دي.د مثال په توګه، په عمومي توګه منل شوی نظر دا دی چې کوچني نانو ذرات د لوی نانو ذراتو په پرتله ډیر زهرجن دي.2 د عمومي ادبیاتو سره په مطابقت کې، زموږ پخوانیو څیړنو د تی لرونکو حجرو او مایکرو ارګانیزمونو په اړه د نانوسیلور اندازې پورې تړلي فعالیت ښودلی.3- 5 د سطحي پوښښ یو بل ځانګړتیا ده چې د نانوومیټریال ملکیتونو باندې پراخه اغیزه لري.یوازې د دې په سطح کې د سټیلیزرونو په اضافه کولو یا بدلولو سره، ورته نانوومیټریال ممکن په بشپړ ډول مختلف فزیکي، کیمیاوي او بیولوژیکي ملکیتونه ولري.د کیپینګ اجنټانو کارول اکثرا د نانو پارټیکل ترکیب د یوې برخې په توګه ترسره کیږي.د مثال په توګه، د سیټریټ ختم شوي د سپینو زرو نانو ذرات په څیړنه کې یو له خورا اړونده AgNPs څخه دي ، کوم چې د عکس العمل وسیلې په توګه په ټاکل شوي سټبلائزر محلول کې د سپینو زرو مالګې کمولو سره ترکیب شوي.6 Citrate کولی شي په اسانۍ سره د خپل ټیټ لګښت، شتون، بایو مطابقت، او د سپینو زرو لپاره قوي تړاو څخه ګټه پورته کړي، کوم چې په مختلفو وړاندیز شوي تعاملاتو کې منعکس کیدی شي، د بیرته راګرځیدونکي سطحې جذب څخه ایونیک تعاملاتو ته.7,8 ته نږدې کوچني مالیکولونه او پولیاتومیک آئنونه لکه سیټریټ، پولیمر، پولی الیکټرولایټس، او بیولوژیکي اجنټان هم معمولا د نانو - سپینو زرو د ثبات لپاره کارول کیږي او په دې کې ځانګړي فعالیت ترسره کوي.9-12
که څه هم د قصدي سطحي کیپینګ لخوا د نانو پارټیکل فعالیت بدلولو امکان خورا په زړه پوري ساحه ده ، د دې سطحي پوښښ اصلي رول د پام وړ ندی ، د نانو پارټیکل سیسټم لپاره کولایډیل ثبات چمتو کوي.د نانومیټریالونو لویه ځانګړې سطحه ساحه به د سطحې لویه انرژي تولید کړي، کوم چې د سیسټم ترموډینامیک وړتیا مخه نیسي ترڅو لږترلږه انرژي ته ورسیږي.13 د مناسب ثبات پرته، دا کولی شي د نانو موادو د راټولیدو لامل شي.Aggregation د مختلفو شکلونو او اندازو د ذراتو د مجموعې جوړښت دی چې هغه وخت رامینځته کیږي کله چې منتشر ذرات سره یو ځای شي او اوسني ترموډینامیک تعامل ذرات ته اجازه ورکوي چې یو بل سره ودریږي.له همدې امله، ثبات کونکي د ذرو تر منځ د کافي لوی تکراري ځواک په معرفي کولو سره د راټولیدو مخنیوي لپاره کارول کیږي ترڅو د دوی ترموډینامیک کشش سره مقابله وکړي.14
که څه هم د ذرې اندازه او د سطحې پوښښ موضوع د بیولوژیکي فعالیتونو د تنظیم کولو په شرایطو کې چې د نانو ذراتو لخوا رامینځته کیږي په بشپړه توګه پلټل شوي، د ذرو راټولول په لویه کچه له پامه غورځول شوې ساحه ده.د بیولوژیکي پلوه اړوندو شرایطو لاندې د نانو ذرات د کولایډیل ثبات حل کولو لپاره نږدې هیڅ بشپړه مطالعه شتون نلري.10,15-17 سربیره پردې، دا مرسته په ځانګړې توګه نادره ده، چیرې چې د مجموعې سره تړلې زهرجنیت هم مطالعه شوی، حتی که دا ممکن د منفي عکس العملونو لامل شي، لکه د ویسکولر تریومبوسس، یا د مطلوب ځانګړتیاوو له لاسه ورکول، لکه د دې زهرجنیت، لکه په 1.18 شکل کې ښودل شوي، 19 ښودل شوي.په حقیقت کې، د سپینو زرو د نانو پارټیکل مقاومت یو څو پیژندل شوي میکانیزمونه د راټولولو سره تړاو لري، ځکه چې ځینې E. coli او Pseudomonas aeruginosa strains د پروټین فلیګیلین، فلیګیلین په څرګندولو سره د دوی د نانو - سپینو زرو حساسیت کموي.دا د سپینو زرو لپاره لوړ تړاو لري، په دې توګه د راټولولو لامل کیږي.20
د سپینو زرو نانو ذراتو زهرجنیت پورې اړوند ډیری مختلف میکانیزمونه شتون لري ، او راټولول په دې ټولو میکانیزمونو اغیزه کوي.د AgNP بیولوژیکي فعالیت ترټولو بحث شوی میتود چې کله ناکله د "Trojan Horse" میکانیزم په نوم یادیږي، AgNPs د Ag+ کیریر په توګه پیژني.1,21 د ټروجن هارس میکانیزم کولی شي په محلي Ag+ غلظت کې لوی زیاتوالی تضمین کړي، کوم چې د ROS او جھلی د تخریب لامل کیږي.22-24 Aggregation کیدای شي د Ag+ په خوشې کیدو اغیزه وکړي، په دې توګه زهرجن اغیزه کوي، ځکه چې دا اغیزمنه فعاله سطحه کموي چیرې چې د سپینو زرو ایونونه اکسیډیز او منحل کیږي.په هرصورت، AgNPs به نه یوازې د آیون خوشې کولو له لارې زهرجن ښکاره کړي.ډیری اندازې او مورفولوژي پورې اړوند تعاملات باید په پام کې ونیول شي.د دوی په منځ کې، د نانو پارټیکل سطح اندازه او شکل تعریف شوي ځانګړتیاوې دي.4,25 د دې میکانیزمونو ټولګه د "د زهرجن زهرجن میکانیزمونو" په توګه طبقه بندي کیدی شي.په بالقوه توګه ډیری مایټوکونډریال او د سطحي غشا تعاملات شتون لري چې کولی شي ارګانیلز ته زیان ورسوي او د حجرو مړینې لامل شي.25-27 څرنګه چې د مجموعو جوړښت په طبیعي ډول د سپینو زرو لرونکی شیانو اندازې او شکل باندې اغیزه کوي چې د ژوندیو سیسټمونو لخوا پیژندل شوي، دا تعاملات هم اغیزمن کیدی شي.
د سپینو زرو نانو ذراتو راټولولو په اړه زموږ په تیرو مقاله کې، موږ د دې ستونزې د مطالعې لپاره د کیمیاوي او ان ویټرو بیولوژیکي تجربو څخه د اغیزمن سکرینینګ کړنالرې ښودلې.19 د دې ډول تفتیشونو لپاره د ډینامیک لایټ سکیټرینګ (DLS) غوره تخنیک دی ځکه چې مواد کولی شي فوټونونه د څپې په اوږدوالي کې توزیع کړي چې د هغې د ذراتو اندازې سره پرتله کیږي.څرنګه چې د مایع په منځ کې د ذراتو د براونین حرکت سرعت د اندازې سره تړاو لري، د ویشل شوي رڼا په شدت کې بدلون د مایع نمونې اوسط هایدروډینامیک قطر (Z-mean) ټاکلو لپاره کارول کیدی شي.28 سربیره پردې، نمونې ته د ولتاژ په پلي کولو سره، د نانو پارټیکل د زیټا پوټینشن (ζ پوټینشن) د Z اوسط ارزښت سره ورته اندازه کیدی شي.13,28 که چیرې د زیټا پوټینشن مطلق ارزښت په کافي اندازه لوړ وي (د عمومي لارښوونو سره سم> ±30 mV)، دا به د مجموعې سره د مقابلې لپاره د ذراتو تر مینځ قوي الکتروسټټیک تکرار رامینځته کړي.د سطحي پلازمون ریزونانس ځانګړتیا (SPR) یو ځانګړی نظری پدیده ده، چې په عمده توګه قیمتي فلزي نانو ذرات (په عمده توګه Au او Ag) ته منسوب شوي.29 په نانوسکل کې د دې موادو د بریښنایی جریانونو (د سطحې پلازمونونو) پراساس، دا معلومه شوه چې کروی AgNPs 400 nm ته نږدې د UV-Vis جذب لوړوالی لري.30 د ذراتو شدت او د طول موج بدلون د DLS پایلو بشپړولو لپاره کارول کیږي، ځکه چې دا طریقه د نانو ذراتو راټولولو او د بایو مالیکولونو سطح جذبولو لپاره کارول کیدی شي.
د ترلاسه شویو معلوماتو پراساس، د حجرو وړتیا (MTT) او د انټي باکتریایي ارزونه په داسې طریقه ترسره کیږي چې د AgNP زهرجنیت د نانو پارټیکل غلظت (تر ټولو عام کارول شوي فکتور) پرځای د مجموعې کچې د فعالیت په توګه تشریح شوي.دا ځانګړی میتود موږ ته اجازه راکوي چې په بیولوژیکي فعالیت کې د راټولولو کچې ژور اهمیت وښیو، ځکه چې د بیلګې په توګه، د سیټریټ ختم شوي AgNPs د راټولیدو له امله په څو ساعتونو کې خپل بیولوژیکي فعالیت په بشپړه توګه له لاسه ورکوي.۱۹
په اوسني کار کې، موږ موخه دا ده چې د بایو پورې اړوند کولایډونو ثبات او په بیولوژیکي فعالیت باندې د دوی اغیزې د نانو پارټیکل مجموعه باندې د نانو پارټیکل اندازې اغیزې مطالعې سره زموږ پخوانۍ مرستې پراخه کړو.دا بې له شکه د نانو ذراتو مطالعه ده.د لوړ پروفایل لید او 31 د دې مسلې د څیړلو لپاره، د تخم منځګړیتوب د ودې طریقه کارول شوې ترڅو د سیټریټ ختم شوي AgNPs په دریو مختلفو اندازو (10، 20، او 50 nm) کې تولید کړي.6,32 یو له خورا عام میتودونو څخه دی.د نانومیټریالونو لپاره چې په پراخه کچه او په منظم ډول په طبي غوښتنلیکونو کې کارول کیږي، د مختلفو اندازو سیټریټ ختم شوي AgNPs د نانو سلور د راټولولو پورې اړوند بیولوژیکي ملکیتونو احتمالي اندازې انحصار مطالعه کولو لپاره غوره شوي.د مختلفو اندازو AgNPs ترکیب کولو وروسته ، موږ تولید شوي نمونې د لیږد بریښنایی مایکروسکوپي (TEM) لخوا مشخصې کړې ، او بیا د پورته ذکر شوي سکرینینګ پروسې په کارولو سره ذرات معاینه کړل.برسېره پردې، د ویټرو حجرو کلتورونو په شتون کې د Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) او Fetal Bovine Serum (FBS)، د اندازې پورې تړلي ټولیز چلند او د هغې چلند په مختلفو pH ارزښتونو، NaCl، ګلوکوز، او ګلوټامین غلظت کې ارزول شوی.د cytotoxicity ځانګړتیاوې د هراړخیز شرایطو لاندې ټاکل کیږي.ساینسي اجماع دا په ګوته کوي چې په عمومي توګه کوچني ذرات غوره دي؛زموږ تحقیق یو کیمیاوي او بیولوژیکي پلیټ فارم چمتو کوي ترڅو معلومه کړي چې ایا دا قضیه ده.
د سپینو زرو درې نانو ذرات د مختلف اندازې سلسلې سره د تخم د منځګړیتوب د ودې میتود لخوا چمتو شوي چې د Wan et al. لخوا وړاندیز شوي، د لږ سمون سره.6 دا طریقه د کیمیاوي کمولو پر بنسټ والړ ده، د سپینو زرو نایټریټ (AgNO3) د سپینو زرو سرچینې په توګه، سوډیم بورهایډرایډ (NaBH4) د کمولو ایجنټ په توګه، او سوډیم سیټریټ د ثبات کونکي په توګه کارول کیږي.لومړی، د سوډیم سیټریټ ډیهایډریټ (Na3C6H5O7 x 2H2O) څخه 75 ملی لیتر د 9 mm citrate آبي محلول چمتو کړئ او 70 درجو ته تودوخه کړئ.بیا، 2 ملی لیتر 1% w/v AgNO3 محلول د عکس العمل میډیم کې اضافه شوي ، او بیا تازه چمتو شوی سوډیم بورهایډرایډ محلول (2 ملی لیتر 0.1% w/v) په غورځیدو سره مخلوط ته واچول شو.په پایله کې ژیړ - نسواري تعلیق د 1 ساعت لپاره په 70 درجې سانتي ګراد کې ساتل شوی، او بیا د خونې د حرارت درجه ته یخ شوی.پایله لرونکې نمونه (له اوس څخه د AgNP-I په نوم یادیږي) په راتلونکي ترکیب مرحله کې د تخم منځګړیتوب وده لپاره د اساس په توګه کارول کیږي.
د منځنۍ اندازې د ذرې تعلیق ترکیب کولو لپاره (د AgNP-II په نوم پیژندل شوی)، 90 ملی لیتر 7.6 ملی لیتر سیټریټ محلول 80 درجې ته تودوخه کړئ، دا د 10 ملی لیتر AgNP-I سره مخلوط کړئ، او بیا د 2 ملی لیتر 1٪ w/v د AgNO3 محلول مخلوط کړئ. د 1 ساعت لپاره د قوي میخانیکي هڅونې لاندې ساتل شوی و، او بیا نمونه د خونې د حرارت درجه یخ شوه.
د لویې ذرې (AgNP-III) لپاره، د ودې ورته پروسه تکرار کړئ، مګر پدې حالت کې، د تخم د تعلیق په توګه 10 ملی لیتر AgNP-II وکاروئ.وروسته له دې چې نمونې د خونې تودوخې ته ورسیږي، دوی د AgNO3 د ټولیز محتوياتو پر بنسټ خپل نومول شوي Ag غلظت 150 ppm ته په 40°C کې د اضافي محلول په اضافه کولو یا تبخیر کولو سره تنظیموي، او په پای کې یې په 4°C کې ذخیره کوي تر څو چې نور استعمال شي.
د FEI Tecnai G2 20 X-Twin Transmission Electron Microscope (TEM) (FEI Corporate Headquarters, Hillsboro, Oregon, USA) د 200 kV سرعت ولتاژ سره د نانو پارټیکل مورفولوژیکي ځانګړتیاو معاینه کولو او د دوی د الکترون توپیر (ED) نمونه ونیسئ.لږترلږه 15 نمایشي عکسونه (~ 750 ذرات) د ImageJ سافټویر کڅوړې په کارولو سره ارزول شوي ، او پایله شوي هسټوګرامونه (او په ټوله مطالعه کې ټول ګرافونه) په OriginPro 2018 (OriginLab, Northampton, MA, USA) 33, 34 کې رامینځته شوي.
د اوسط هایدروډینامیک قطر (Z- اوسط)، د زیټا احتمالي (ζ-احتمال) او د نمونو ځانګړتیا د سطحي پلازمون ریزونانس (SPR) اندازه شوې ترڅو د دوی لومړني کولیډیل ملکیتونه روښانه کړي.د نمونې منځنۍ هایدروډینامیک قطر او د زیټا پوټینشن د مالورن زیتاسایزر نانو ZS وسیلې (مالورن وسایل، مالورن، انګلستان) لخوا په 37 ± 0.1 ° C کې د ضایع کیدو وړ فولډ شوي کیپیلري حجرو په کارولو سره اندازه شوي.Ocean Optics 355 DH-2000-BAL UV-Vis spectrophotometer (Halma PLC, Largo, FL, USA) د 250-800 nm په حد کې د نمونو د UV-Vis جذب سپیکٹرا څخه د SPR ځانګړتیاو ترلاسه کولو لپاره کارول شوی و.
د ټولې تجربې په جریان کې، د کولایډیل ثبات پورې اړوند درې مختلف اندازه کولو ډولونه په ورته وخت کې ترسره شوي.د ذراتو د اوسط هایدروډینامیک قطر (Z اوسط) او د زیټا پوټینشن (ζ پوټینشن) اندازه کولو لپاره DLS وکاروئ ، ځکه چې د Z اوسط د نانو پارټیکل مجموعو اوسط اندازې پورې اړه لري ، او د زیټا پوټینشن په ګوته کوي چې ایا په سیسټم کې د الیکټروسټاټیک تکرار دومره قوي دی چې د نانو ذراتو تر مینځ د وان ډر والز جذب مخه ونیسي.اندازه کول په درې اړخیزه توګه جوړ شوي، او د Z معنی او زیټا احتمالي معیاري انحراف د Zetasizer سافټویر لخوا محاسبه کیږي.د ذراتو ځانګړتیا SPR سپیکٹرا د UV-Vis spectroscopy لخوا ارزول کیږي، ځکه چې د لوړ شدت او څپې اوږدوالی کې بدلون کولی شي د راټولولو او سطحې تعامل په ګوته کړي.29,35 په حقیقت کې په قیمتي فلزاتو کې د سطحي پلازمون ریزونانس دومره اغیزناک دی چې دا د بایو مالیکولونو تحلیل نوي میتودونو ته لاره هواره کړې.29,36,37 په تجربوي مخلوط کې د AgNPs غلظت شاوخوا 10 ppm دی، او موخه یې دا ده چې د اعظمي ابتدايي SPR جذب شدت 1 ته وټاکي. تجربه په وخت پورې تړلې په 0 کې ترسره شوې؛1.5;۳;۶;12 او 24 ساعته د بیولوژیکي پلوه د مختلف شرایطو لاندې.د تجربې تشریح کولو نور توضیحات زموږ په تیرو کارونو کې لیدل کیدی شي.19 په لنډه توګه، مختلف pH ارزښتونه (3؛ 5؛ 7.2 او 9)، مختلف سوډیم کلورایډ (10 mM؛ 50 mM؛ 150 mM)، ګلوکوز (3.9 mM؛ 6.7 mM) او ګلوټامین (4 mM) غلظت، او همدارنګه د Dulbecco ترمیم شوي عقاب میډیم (DMEM) او Fetal Bovine Serum (FBS) (په اوبو او DMEM کې) د ماډل سیسټمونو په توګه چمتو کړل، او د ترکیب شوي سپینو زرو نانو ذراتو په مجموعي چلند باندې یې د دوی اغیزې مطالعه کړې.pH د NaCl، ګلوکوز، او ګلوټامین ارزښتونه د فیزولوژیکي غلظت پر بنسټ ارزول کیږي، پداسې حال کې چې د DMEM او FBS مقدارونه د ویټرو تجربه کې کارول شوي کچې ته ورته دي.38-42 ټول اندازه کول په pH 7.2 او 37 ° C کې د 10 mM NaCl د دوامداره شالید مالګې غلظت سره ترسره شوي ترڅو د اوږد واټن ذرې تعامل له مینځه ویسي (پرته له ځینې pH او NaCl پورې اړوند تجربو څخه ، چیرې چې دا ځانګړتیاوې د لاندې متغیرات دي. مطالعه).28 د مختلفو شرایطو لیست په 1 جدول کې لنډیز شوی. هغه تجربه چې د † سره نښه شوې د یوې مرجع په توګه کارول کیږي او د یوې نمونې سره مطابقت لري چې 10 mM NaCl او pH 7.2 لري.
د انسان د پروستات سرطان حجرې لاین (DU145) او د تل پاتې انسان کیراټینوسایټس (HaCaT) د ATCC (ماناساس، VA، USA) څخه ترلاسه شوي.حجرې په منظم ډول د Dulbecco لږ تر لږه اړین منځني عقاب (DMEM) کې کرل کیږي چې 4.5 g/L ګلوکوز لري (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, USA)، د 10% FBS، 2 mM L-glutamine، 0.010% 0.0105 او Strepmint. پنسلین (Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, USA).حجرې د 37 درجې C انکیوبټر کې د 5٪ CO2 او 95٪ رطوبت لاندې کرل کیږي.
د دې لپاره چې د AgNP cytotoxicity کې بدلونونه په وخت پورې تړلي د ذرو د راټولولو له امله رامینځته شوي، د MTT دوه مرحلې ارزونه ترسره شوه.لومړی، د دوو حجرو ډولونو د عمل وړتیا د AgNP-I، AgNP-II او AgNP-III سره د درملنې وروسته اندازه شوې.د دې لپاره، دوه ډوله حجرې د 10,000 حجرو / څاه په کثافت کې په 96 څاه پلیټونو کې تخم شوي او په دویمه ورځ د غلظت په زیاتوالي کې د درې مختلف اندازې سپینو زرو نانو ذراتو سره درملنه شوې.د 24 ساعتونو درملنې وروسته، حجرې د PBS سره مینځل شوي او د 0.5 mg/mL MTT reagent (SERVA, Heidelberg, Germany) سره د کلتور په مینځ کې د 1 ساعت لپاره د 37 درجې سانتي ګراد سره مینځل شوي.Formazan کرسټال په DMSO (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, USA) کې منحل شوي، او جذب د Synergy HTX پلیټ ریډر (BioTek-Hungary, Budapest, Hungary) په کارولو سره په 570 nm اندازه شوی.د نه درملنې شوي کنټرول نمونې جذب ارزښت 100٪ د بقا کچه ګڼل کیږي.د څلورو خپلواکو بیولوژیکي نقلونو په کارولو سره لږترلږه 3 تجربې ترسره کړئ.IC50 د ژوند د پایلو پراساس د خوراک غبرګون وکر څخه محاسبه کیږي.
بیا وروسته، په دویم ګام کې، د 150 mM NaCl سره ذرات د مختلفو وختونو (0، 1.5، 3، 6، 12، او 24 ساعتونو) لپاره د حجرو د درملنې دمخه، د سپینو زرو نانو ذراتو مختلف ټولیز حالتونه تولید شوي.وروسته، ورته MTT ارزونه ترسره شوه لکه څنګه چې مخکې تشریح شوي ترڅو د ذرو د راټولولو لخوا اغیزمن شوي د حجرو په وړتیا کې بدلونونه ارزونه وکړي.د وروستۍ پایلې ارزولو لپاره د GraphPad Prism 7 څخه کار واخلئ، د تجربې احصایوي اهمیت د نه جوړه شوي ټیسټ په واسطه محاسبه کړئ، او د هغې کچه د * (p ≤ 0.05)، ** (p ≤ 0.01)، *** (p ≤ 0.001) په توګه نښه کړئ ) او **** (p ≤ 0.0001).
د سپینو زرو نانو ذرات درې مختلفې اندازې (AgNP-I، AgNP-II او AgNP-III) د کریپټوکوکس نیوفورمینز IFM 5844 (IFM؛ د رنځجنیک فنګسي او مایکروبیل توکسیولوژي لپاره د څیړنې مرکز، د چیبا پوهنتون) او باکیلیوس S6MCZ3 ټیسټ لپاره د باکتریا ضد حساسیت لپاره کارول شوي. (SZMC: Szeged Microbiology Collection) او E. coli SZMC 0582 په RPMI 1640 منځني (Sigma-Aldrich Co.).د ذرو د راټولولو له امله د انټي باکتریا په فعالیت کې د بدلونونو ارزولو لپاره، لومړی، د دوی لږترلږه مخنیوی غلظت (MIC) د 96 څاه مایکروټیټر پلیټ کې د مایکروډیلیشن لخوا ټاکل شوی و.د معیاري حجرو تعلیق 50 μL ته (5 × 104 حجرې/mL په RPMI 1640 متوسطه کې)، 50 μL د سپینو نانو پارټیکل تعلیق اضافه کړئ او په سیریل ډول دوه ځله غلظت ضعیف کړئ (په پورته ذکر شوي متوسط ​​​​کې، حد 0 او 75 ppm دی، دا دی. د کنټرول نمونه کې 50 μL د حجرو تعلیق او 50 μL متوسط ​​​​پرته له نانو پارټیکل شامل دي).بیا وروسته، پلیټ د 48 ساعتونو لپاره په 30 ° C کې کیښودل شو، او د کلتور نظری کثافت د SPECTROstar نانو پلیټ ریډر (BMG LabTech، Offenburg، Germany) په کارولو سره په 620 nm اندازه شوی.تجربه درې ځله په درې اړخیزه توګه ترسره شوه.
پرته له دې چې په دې وخت کې 50 μL واحد راټول شوي نانو پارټیکل نمونې کارول شوي، ورته کړنالره لکه څنګه چې مخکې تشریح شوي د پورته ذکر شوي فشارونو په وړاندې د انټي باکتریایي فعالیتونو د راټولولو اغیزې معاینه کولو لپاره کارول کیده.د سپینو زرو نانو ذرات مختلف مجموعه حالتونه د حجرو پروسس کولو دمخه د مختلف وختونو (0, 1.5, 3, 6, 12 او 24 ساعتونو) لپاره د ذرات 150 mM NaCl سره د انکیوبیټ کولو سره تولید کیږي.یو تعلیق چې د RPMI 1640 منځنی 50 μL سره ضمیمه شوی د ودې کنټرول په توګه کارول شوی و ، پداسې حال کې چې د زهرجن کنټرول لپاره ، د غیر راټول شوي نانو ذرات سره تعلیق کارول شوی و.تجربه درې ځله په درې اړخیزه توګه ترسره شوه.د ګراف پیډ پریزم 7 وکاروئ ترڅو د وروستۍ پایلې بیا ارزونه وکړئ، د ورته احصایوي تحلیلونو په کارولو سره د MTT تحلیل په څیر.
د وړو ذراتو د راټولولو کچه (AgNP-I) مشخص شوې، او پایلې یې په جزوي توګه زموږ په تیرو کارونو کې خپرې شوې، مګر د ښه پرتله کولو لپاره، ټولې ذرات په بشپړه توګه وڅیړل شول.تجربوي معلومات راټول شوي او په لاندې برخو کې بحث کیږي.د AgNP درې اندازې.۱۹
د TEM، UV-Vis او DLS لخوا ترسره شوي اندازه کول د ټولو AgNP نمونو بریالي ترکیب تایید کړي (شکل 2A-D).د 2 شکل د لومړي قطار له مخې، ترټولو کوچنۍ ذره (AgNP-I) د 10 nm اوسط قطر سره یونیفورم کروی مورفولوژي ښیي.د تخم په منځګړیتوب د ودې طریقه د AgNP-II او AgNP-III د مختلفو اندازو رینجونو سره هم چمتو کوي چې په ترتیب سره نږدې 20 nm او 50 nm اوسط ذرې قطر لري.د ذرو د توزیع د معیاري انحراف له مخې، د دریو نمونو اندازه نه یو بل سره یوځای کیږي، کوم چې د دوی د پرتله کولو تحلیل لپاره مهم دی.د TEM پر بنسټ د ذرې 2D اټکلونو اوسط اړخ تناسب او پتلی تناسب پرتله کولو سره، داسې انګیرل کیږي چې د ذراتو کره د ImageJ شکل فلټر پلګ ان (انځور 2E) لخوا ارزول کیږي.43 د ذراتو د شکل د تحلیل له مخې، د دوی د اړخ نسبت (لوی اړخ/د تر ټولو کوچنی محیط مستطیل لنډ اړخ) د ذرو د ودې او د دوی د نرۍ نسبت (د اړوند کامل حلقې اندازه شوې ساحه/نظري ساحه) نه متاثره کیږي. ) په تدریجي ډول کمیږي.دا د ډیرو او ډیرو پولی هیډرل ذراتو پایله ده، کوم چې په تیوري کې په بشپړه توګه ګردي دي، د 1 د پتلي تناسب سره مطابقت لري.
شکل 2 د لیږد الیکترون مایکروسکوپ (TEM) عکس (A)، د الکترون توپیر (ED) نمونه (B)، د اندازې ویش هسټوګرام (C)، ځانګړتیا د الټرا وایلیټ لیدل (UV-Vis) د رڼا جذب سپیکٹرم (D)، او اوسط مایع سایټریټ - د میخانیکي قطر (Z- اوسط) سره د سپینو زرو نانو ذرات ، د زیټا احتمالي ، د اړخ تناسب او ضخامت تناسب (E) درې مختلف اندازې لري: AgNP-I 10 nm (پورته قطار) ، AgNP -II 20 nm (منځنی قطار) دی )، AgNP-III (لاندې قطار) 50 nm دی.
که څه هم د ودې میتود سایکلیک طبیعت تر یو حد پورې د ذرې په شکل اغیزه کړې، په پایله کې د لوی AgNPs کوچنۍ کره شوې، ټولې درې نمونې نیم کروی پاتې شوې.برسېره پردې، لکه څنګه چې په 2B شکل کې د الکترون د توپیر په بڼه کې ښودل شوي، نانو د ذراتو کرسټالیت اغیزه نلري.د تفاوت مهمې حلقې - چې د (111)، (220)، (200)، او (311) د سپینو زرو ملیر شاخصونو سره تړاو لري - د ساینسي ادبیاتو او زموږ پخوانیو ونډو سره خورا مطابقت لري.9, 19,44 د AgNP-II او AgNP-III د Debye-Scherrer حلقې ټوټه ټوټه کول د دې حقیقت له امله دي چې د ED عکس په ورته میګنیفیکیشن کې نیول شوی، نو لکه څنګه چې د ذرې اندازه زیاتیږي، د هر ډول جلا شوي ذراتو شمیر. د واحد ساحه زیاتیږي او کمیږي.
د نانو ذراتو اندازه او شکل د بیولوژیکي فعالیت اغیزه کولو لپاره پیژندل کیږي.3,45 د شکل پورې تړلی کتلیتیک او بیولوژیکي فعالیت د دې حقیقت له مخې تشریح کیدی شي چې مختلف شکلونه د ځانګړي کرسټال مخونو وده کوي (د مختلف ملیر شاخصونه لري) او دا کرسټال مخونه مختلف فعالیتونه لري.45,46 څرنګه چې چمتو شوي ذرات د ورته ورته کریسټال ځانګړتیاو سره ورته ورته ED پایلې وړاندې کوي، داسې انګیرل کیدی شي چې زموږ په راتلونکو کولایډیل ثبات او بیولوژیکي فعالیتونو تجربو کې، کوم لیدل شوي توپیرونه باید د نانو پارټیکل اندازې ته منسوب شي، نه د شکل پورې اړوند ملکیتونو.
د UV-Vis پایلې په 2D شکل کې لنډیز شوي د ترکیب شوي AgNP په پراخه کروي طبیعت باندې نور هم ټینګار کوي، ځکه چې د ټولو دریو نمونو د SPR چوکۍ شاوخوا 400 nm دي، کوم چې د سپینو زرو نانو ذراتو ځانګړتیا ارزښت دی.29,30 نیول شوي سپیکٹرا هم د نانو سلور د تخم په منځګړیتوب بریالي وده تایید کړه.لکه څنګه چې د ذرې اندازه زیاتیږي، د څپې اوږدوالی د AgNP-II د اعظمي ر lightا جذب سره مطابقت لري - ډیر څرګند - د ادبیاتو له مخې ، AgNP-III د ریډ شفټ تجربه کوي.۶،۲۹
د AgNP سیسټم د ابتدايي کولایډیل ثبات په اړه، DLS په pH 7.2 کې د ذراتو د اوسط هایدروډینامیک قطر او زیټا پوټینشن اندازه کولو لپاره کارول کیده.هغه پایلې چې په 2E شکل کې ښودل شوي ښیي چې AgNP-III د AgNP-I یا AgNP-II په پرتله لوړ کولیډیال ثبات لري، ځکه چې عام لارښوونې ښیي چې د 30 mV مطلق زیټا پوټینشن د اوږدمهاله کولایډیل ثبات لپاره اړین دی کله چې دا موندنه نوره هم ملاتړ کیږي. د Z اوسط ارزښت (د وړیا او راټول شوي ذراتو د اوسط هایدروډینامیک قطر په توګه ترلاسه شوی) د TEM لخوا ترلاسه شوي لومړني ذرې اندازې سره پرتله کیږي ، ځکه چې څومره دوه ارزښتونه سره نږدې وي ، په نمونه کې د درجې ټیټه کچه راټولیږي.په حقیقت کې، د AgNP-I او AgNP-II Z اوسط د دوی د اصلي TEM ارزول شوي ذرې اندازې څخه په مناسب ډول لوړ دی، نو د AgNP-III سره پرتله کول، دا نمونې اټکل کیږي چې د مجموعې احتمال ډیر وي، چیرې چې د خورا منفي زیټا احتمال شتون لري. د نږدې اندازې سره د Z اوسط ارزښت سره.
د دې پدیدې توضیحات دوه چنده کیدی شي.له یوې خوا ، د سیټریټ غلظت په ټولو ترکیب مرحلو کې په ورته کچه ساتل کیږي ، د چارج شوي سطحې ګروپونو نسبتا لوړه اندازه چمتو کوي ترڅو د وده کونکي ذرات ځانګړي سطحي ساحې له کمیدو څخه مخنیوی وکړي.په هرصورت، د Levak et al. په وینا، کوچني مالیکولونه لکه سیټریټ د نانو ذراتو په سطحه د بایو مالیکولونو لخوا په اسانۍ سره تبادله کیدی شي.په دې حالت کې، د کولایډیل ثبات به د تولید شوي بایو مالیکولونو کورونا لخوا ټاکل کیږي.31 ځکه چې دا چلند زموږ د مجموعې په اندازه کولو کې هم لیدل شوی (وروسته به په تفصیل سره بحث وشي)، یوازې د سیټریټ کیپنګ دا پدیده نشي تشریح کولی.
له بلې خوا، د ذرې اندازه د نانومیټر په کچه د راټولولو تمایل سره په متناسب ډول متناسب ده.دا په عمده توګه د دودیز Derjaguin-Landau-Verwey-Overbeek (DLVO) میتود لخوا ملاتړ کیږي، چیرې چې د ذراتو جذب د ذراتو ترمنځ د جذب او تکراري ځواکونو مجموعې په توګه بیان شوی.د He et al. په وینا، د DLVO انرژی وکر اعظمي ارزښت په هیماتیټ نانو پارټیکلونو کې د نانو ذراتو د اندازې سره کمیږي، چې دا لږ تر لږه ابتدايي انرژی ته رسیدل اسانه کوي، په دې توګه د نه بدلیدونکي مجموعې (کنډیشن) ​​ته وده ورکوي.47 په هرصورت، داسې اټکل کیږي چې د DLVO تیوري له محدودیتونو هاخوا نور اړخونه هم شتون لري.که څه هم د van der Waals جاذبه او د الکتروسټیک ډبل پرت تکرار د ذرو د اندازې زیاتوالي سره ورته دي، د Hotze et al بیاکتنه.وړاندیز کوي چې دا د DLVO په پرتله په راټولولو باندې قوي اغیزه لري.14 دوی په دې باور دي چې د نانو ذراتو د سطحې منحل کول نور نشي کولی د فلیټ سطح په توګه اټکل شي، د ریاضیاتو اټکل د تطبیق وړ نه دی.سربیره پردې ، لکه څنګه چې د ذرې اندازه کمیږي ، په سطح کې د موجود اتومونو سلنه لوړه کیږي ، چې د بریښنایی جوړښت او د سطح چارج چلند لامل کیږي.او د سطحي تعامل بدلونونه، کوم چې کیدای شي د بریښنا په ډبل طبقه کې د چارج کمښت المل شي او راټولولو ته وده ورکړي.
کله چې په 3 شکل کې د AgNP-I، AgNP-II، او AgNP-III د DLS پایلې پرتله کړئ، موږ ولیدل چې ټولې درې نمونې د pH هڅونې سره ورته والی ښودلی.یو ډیر تیزابي چاپیریال (pH 3) د نمونې د زیټا پوټینشن 0 mV ته لیږدوي، د ذرې د مایکرون په اندازه مجموعه رامینځته کوي، پداسې حال کې چې الکلین pH د زیټا پوټینشن لوی منفي ارزښت ته لیږدوي، چیرته چې ذرات کوچني مجموعې جوړوي (pH 5) ).او 7.2) )، یا په بشپړه توګه غیر منظم پاتې کیږي (pH 9).د مختلفو نمونو ترمنځ ځینې مهم توپیرونه هم لیدل شوي.د تجربې په جریان کې، AgNP-I د pH-حوصلې شوي زیټا احتمالي بدلونونو لپاره خورا حساس ثابت شو، ځکه چې د دې ذراتو زیټا ظرفیت د pH 9 په پرتله په 7.2 کې کم شوی، پداسې حال کې چې AgNP-II او AgNP-III یوازې A ښودل شوی. په ζ کې د پام وړ بدلون د pH 3 په شاوخوا کې دی. برسیره پردې، AgNP-II ورو بدلونونه او د زیټا منځنۍ وړتیا ښودلې، پداسې حال کې چې AgNP-III د دریو څخه نرم چلند ښودلی، ځکه چې سیسټم خورا لوړ مطلق زیټا ارزښت او ورو رجحان حرکت ښودلی، دا په ګوته کوي AgNP-III د pH هڅول شوي مجموعې په وړاندې خورا مقاومت لري.دا پایلې د اوسط هایدروډینامیک قطر اندازه کولو پایلو سره مطابقت لري.د خپلو پرائمرونو د ذراتو اندازې په پام کې نیولو سره، AgNP-I په ټولو pH ارزښتونو کې دوامداره تدریجي مجموعه ښودلې، ډیری احتمال د 10 mM NaCl شالید له امله، پداسې حال کې چې AgNP-II او AgNP-III یوازې د pH 3 راټولولو کې د پام وړ ښودل شوي.تر ټولو په زړه پورې توپیر دا دی چې د دې لوی نانو پارټیکل اندازې سره سره، AgNP-III په 24 ساعتونو کې د pH 3 کې ترټولو کوچنی مجموعه جوړوي، د راټولولو ضد ځانګړتیاوې په ګوته کوي.د چمتو شوي نمونې د ارزښت له مخې د 24 ساعتونو وروسته په pH 3 کې د AgNPs اوسط Z ویشلو سره، دا لیدل کیدی شي چې د AgNP-I او AgNP-II نسبتا مجموعي اندازې 50 ځله، 42 ځله، او 22 ځله زیاتې شوي. په ترتیب سره.III.
شکل 3 د سیټریټ ختم شوي د سپینو زرو نانو ذراتو نمونې د متحرک رڼا توزیع پایلې د ډیریدونکي اندازې سره (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II او 50 nm: AgNP-III) د اوسط هایدروډینامیک قطر (Z اوسط) په توګه څرګند شوي. ) (ښي) د مختلفو pH شرایطو لاندې، د زیټا پوټینشن (کیڼ اړخ) په 24 ساعتونو کې بدلیږي.
مشاهده شوي pH پورې تړلي راټولول د AgNP نمونو ځانګړتیا سطحي پلازمون ریزونانس (SPR) هم اغیزه کړې، لکه څنګه چې د دوی د UV-Vis سپیکٹرا لخوا ثبوت شوی.د ضمیمه شکل S1 په وینا، د ټولو دریو سپینو زرو نانو پارټیکل تعلیقونو راټولول د دوی د SPR چوټیو شدت کمولو او یو معتدل سور بدلون تعقیبوي.د pH د فعالیت په توګه د دې بدلونونو کچه د DLS پایلو لخوا وړاندوینه شوي د راټولولو درجې سره مطابقت لري ، په هرصورت ، ځینې په زړه پوري رجحانات لیدل شوي.د شعور برعکس، دا معلومه شوه چې د منځنۍ اندازې AgNP-II د SPR بدلونونو لپاره خورا حساس دی، پداسې حال کې چې نور دوه نمونې لږ حساس دي.د SPR په څیړنه کې، 50 nm د نظري ذراتو اندازه محدودیت دی، کوم چې د دوی د ډایالټریک ځانګړتیاو پر بنسټ د ذراتو توپیر لپاره کارول کیږي.د 50 nm څخه کوچنۍ ذرات (AgNP-I او AgNP-II) د ساده ډایالټریک ډیپولونو په توګه تشریح کیدی شي، پداسې حال کې چې هغه ذرات چې دې حد ته رسیدلي یا ډیریږي (AgNP-III) ډیر پیچلي ډایالټریک ځانګړتیاوې لري، او د دوی ریزونانس بانډ په څو ماډل بدلونونو ویشل کیږي. .د دوو کوچنیو ذرو نمونو په صورت کې، AgNPs د ساده ډیپول په توګه ګڼل کیدی شي، او پلازما کولی شي په اسانۍ سره یوځای شي.لکه څنګه چې د ذرې اندازه زیاتیږي، دا جوړه کول په اصل کې لوی پلازما تولیدوي، کوم چې ممکن د لیدل شوي لوړ حساسیت تشریح کړي.29 په هرصورت، د لویو ذراتو لپاره، د ساده ډیپول اټکل د اعتبار وړ نه دی کله چې نور جوړونکي حالتونه هم واقع شي، کوم چې کولی شي د AgNP-III کم شوي تمایل تشریح کړي ترڅو د طیف بدلونونو څرګندونه وکړي.۲۹
زموږ د تجربوي شرایطو لاندې ، دا ثابته شوې چې د pH ارزښت د مختلف اندازو سیټریټ لیپټ سپینو زرو نانو پارټیکلونو کولایډیل ثبات باندې ژور تاثیر لري.په دې سیسټمونو کې، ثبات د منفي چارج شوي -COO- ګروپونو لخوا د AgNPs په سطحه چمتو کیږي.د سیټریټ ایون کاربوکسیل فعاله ډله د H+ آیونونو په لوی شمیر کې پروتون شوې ده، نو د تولید شوي کاربوکسیل ګروپ نور نشي کولی د ذراتو تر منځ الکتروسټاتیک تکرار چمتو کړي، لکه څنګه چې د 4 شکل په پورتنۍ قطار کې ښودل شوي. د Le Chatelier اصولو سره سم، AgNP نمونې په چټکۍ سره په pH 3 کې راټولیږي، مګر په تدریجي توګه د pH د زیاتوالي سره ډیر او مستحکم کیږي.
شکل 4 د سطحي تعامل سکیمیک میکانیزم د مختلف pH (پورته قطار) ، د NaCl غلظت (منځنی قطار) او بایو مالیکولز (لاندې قطار) لاندې د راټولولو لخوا تعریف شوی.
د 5 شکل له مخې، د مختلفو اندازو AgNP تعلیق کې د کولایډیل ثبات هم د مالګې زیاتوالي الندې معاینه شوی.د زیټا پوټینشن پراساس ، د دې سیټریټ لخوا ختم شوي AgNP سیسټمونو کې د نانو پارټیکل اندازه یوځل بیا د NaCl څخه د بهرني تاثیراتو لپاره لوړ مقاومت چمتو کوي.په AgNP-I کې، 10 mM NaCl د معتدل راټولولو لپاره کافي دي، او د 50 mm د مالګې غلظت خورا ورته پایلې وړاندې کوي.په AgNP-II او AgNP-III کې، 10 mM NaCl د زیټا پوټینشن باندې د پام وړ اغیزه نه کوي ځکه چې د دوی ارزښتونه په (AgNP-II) یا لاندې (AgNP-III) -30 mV کې پاتې کیږي.د NaCl غلظت تر 50 mm او په پای کې 150 mm NaCl ته لوړول کافي دي چې په ټولو نمونو کې د زیټا پوټینشن مطلق ارزښت د پام وړ کم کړي، که څه هم لوی ذرات ډیر منفي چارج ساتي.دا پایلې د AgNPs متوقع اوسط هایدروډینامیک قطر سره مطابقت لري؛د Z اوسط رجحان کرښې په 10، 50، او 150 mM NaCl کې اندازه شوي مختلف، په تدریجي ډول زیاتیدونکي ارزښتونه ښیې.په نهایت کې، د مایکرون اندازې مجموعې په ټولو دریو 150 mM تجربو کې کشف شوې.
شکل 5 د سیټریټ ختم شوي د سپینو زرو نانو ذراتو نمونې د متحرک ر lightا خپریدو پایلې د ډیریدونکي اندازې سره (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II او 50 nm: AgNP-III) د اوسط هایدروډینامیک قطر (Z اوسط) په توګه څرګند شوي. ) (ښي) او د زیټا پوټینشن (کیڼ اړخ) په 24 ساعتونو کې د مختلف NaCl غلظت لاندې بدلیږي.
په اضافي شکل S2 کې د UV-Vis پایلې ښیي چې په ټولو دریو نمونو کې د 50 او 150 mM NaCl SPR سمدستي او د پام وړ کمښت لري.دا د DLS لخوا تشریح کیدی شي، ځکه چې د NaCl پر بنسټ راټولول د pH پورې تړلو تجربو په پرتله ګړندي واقع کیږي، کوم چې د ابتدايي (0، 1.5، او 3 ساعتونو) اندازه کولو ترمنځ لوی توپیر لخوا تشریح شوی.برسېره پردې، د مالګې غلظت زیاتول به د تجربوي منځني نسب اجازه هم زیاته کړي، کوم چې به د سطحې پلازمون ریزونانس باندې ژوره اغیزه ولري.۲۹
د NaCl اغیز د 4 شکل په منځني قطار کې لنډیز شوی. په ټولیزه توګه، دا نتیجه اخیستل کیدی شي چې د سوډیم کلورایډ غلظت زیاتول د تیزابیت زیاتوالي په څیر ورته اغیزه لري، ځکه چې Na+ آیونونه د کاربوکسیلټ ګروپونو شاوخوا همغږي کولو تمایل لري، د منفي زیټا احتمالي AgNPs فشارول.برسېره پردې، 150 mM NaCl په ټولو دریو نمونو کې د مایکرون اندازې مجموعې تولید کړې، چې دا په ګوته کوي چې د فیزولوژیکي الکترولیت غلظت د سیټریټ ختم شوي AgNPs د کوللوډال ثبات ته زیان رسوي.په ورته AgNP سیسټمونو کې د NaCl د انتقادي غلظت غلظت (CCC) په پام کې نیولو سره، دا پایلې په هوښیارۍ سره په اړونده ادبیاتو کې ځای په ځای کیدی شي.Huynh et al.محاسبه کړه چې د citrate-ختم شوي سپینو زرو نانو ذراتو لپاره د 71 nm اوسط قطر سره د NaCl CCC 47.6 mm و، پداسې حال کې چې El Badawy et al.لیدل شوي چې د 10 nm AgNPs CCC د سیټریټ کوټینګ سره 70 mm و.10,16 برسېره پردې، د 300 mM په اړه د پام وړ لوړ CCC د He et al. لخوا اندازه شوی، چې د دوی د ترکیب طریقه د مخکینۍ ذکر شوي خپرونې څخه توپیر لري.48 که څه هم اوسنۍ مرسته د دې ارزښتونو هراړخیز تحلیل په هدف نه ده، ځکه چې زموږ تجربوي شرایط د ټولې مطالعې په پیچلتیا کې مخ په زیاتیدو دي، د بیولوژیکي پلوه اړونده NaCl غلظت د 50 mm په ځانګړې توګه د 150 mM NaCl خورا لوړ ښکاري.هڅول شوي کوګولیشن، کشف شوي قوي بدلونونه تشریح کوي.
د پولیمرائزیشن تجربه کې بل ګام د ساده مګر بیولوژیکي اړونده مالیکولونو کارول دي ترڅو د نانو پارټیکل - بایومولیکول تعاملات تقلید کړي.د DLS (انځور 6 او 7) او د UV-Vis پایلو (اضافی ارقام S3 او S4) پر بنسټ، ځینې عمومي پایلې تاکید کیدی شي.زموږ د تجربوي شرایطو لاندې، مطالعه شوي مالیکولونه ګلوکوز او ګلوټامین به په هیڅ AgNP سیسټم کې راټول نشي، ځکه چې د Z-mean رجحان د اړونده حواله اندازه کولو ارزښت سره نږدې تړاو لري.که څه هم د دوی شتون په مجموعه اغیزه نه کوي، تجربې پایلې ښیي چې دا مالیکولونه په جزوي توګه د AgNPs په سطحه جذب شوي.د دې نظر ملاتړ کولو ترټولو مهمې پایلې د رڼا جذب کې لیدل شوي بدلون دی.که څه هم AgNP-I د معنی وړ موج اوږدوالی یا شدت بدلون نه ښیې، دا د لویو ذراتو په اندازه کولو سره په روښانه توګه لیدل کیدی شي، کوم چې ډیری احتمال د لوی نظری حساسیت له امله دی چې مخکې یې یادونه وشوه.د غلظت په پام کې نیولو پرته، ګلوکوز کولی شي د کنټرول اندازه کولو په پرتله د 1.5 ساعتونو وروسته د لوی سور بدلون لامل شي، کوم چې په AgNP-II کې شاوخوا 40 nm او په AgNP-III کې شاوخوا 10 nm دی، کوم چې د سطحې تعاملاتو پیښې ثابتوي.ګلوټامین ورته ورته رجحان ښودلی، مګر بدلون دومره څرګند نه و.سربیره پردې، دا هم د یادولو وړ ده چې ګلوټامین کولی شي د متوسط ​​​​او لویو ذراتو مطلق زیټا ظرفیت کم کړي.په هرصورت، ځکه چې دا د زیټا بدلونونه د مجموعې په کچه اغیزه نه کوي، دا اټکل کیدی شي چې حتی کوچني بایومولیکولونه لکه ګلوټامین کولی شي د ذراتو ترمنځ د ځایي تکرار یوه اندازه چمتو کړي.
شکل 6 د سیټریټ ختم شوي د سپینو زرو نانو پارټیکل نمونو متحرک ر lightا توزیع پایلې د ډیریدونکي اندازې سره (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II او 50 nm: AgNP-III) د اوسط هایدروډینامیک قطر (Z اوسط) په توګه څرګند شوي. (ښي) د مختلف ګلوکوز غلظت په بهرني شرایطو کې ، د زیټا احتمال (کیڼ اړخ) په 24 ساعتونو کې بدلیږي.
شکل 7 د سیټریټ ختم شوي د سپینو زرو نانو ذراتو نمونې د متحرک رڼا توزیع پایلې د زیاتیدونکي اندازې سره (10 nm: AgNP-I، 20 nm: AgNP-II او 50 nm: AgNP-III) د اوسط هایدروډینامیک قطر (Z اوسط) په توګه څرګند شوي. ) (ښي) د ګلوټامین په شتون کې، د زیټا احتمالي (کیڼ اړخ) په 24 ساعتونو کې بدلون راځي.
په لنډه توګه، کوچني بایومولکولونه لکه ګلوکوز او ګلوټامین په اندازه شوي غلظت کې د کولایډیل ثبات اغیزه نه کوي: که څه هم دوی د زیټا پوټینشن او د UV-Vis پایلې په مختلف درجو اغیزه کوي، د Z اوسط پایلې مطابقت نلري.دا په ګوته کوي چې د مالیکولونو سطحي جذب د الیکټروسټاټیک تکرار مخه نیسي ، مګر په ورته وخت کې ابعادي ثبات چمتو کوي.
د دې لپاره چې پخوانۍ پایلې له پخوانیو پایلو سره وصل کړئ او بیولوژیکي شرایط په ډیر مهارت سره سم کړئ، موږ د حجرو کلتور ځینې خورا عام استعمال شوي اجزاوې غوره کړې او د AgNP کولایډونو ثبات مطالعې لپاره یې د تجربوي شرایطو په توګه کارولې.د ویټرو په ټوله تجربه کې، د منځني په توګه د DMEM یو له خورا مهم وظیفو څخه د اړتیا وړ اوسموټیک شرایط رامینځته کول دي، مګر د کیمیاوي نقطه نظر څخه، دا د 150 mM NaCl سره ورته ټول آیونیک ځواک سره یو پیچلی مالګې محلول دی. .40 لکه څنګه چې د FBS لپاره، دا د بایو مالیکولونو - په عمده توګه د پروټینونو یو پیچلی مخلوط دی - د سطحې جذب له نظره، دا د ګلوکوز او ګلوټامین تجربو پایلو سره یو څه ورته والی لري، سره له دې چې د کیمیاوي جوړښت او تنوع سره سره جنسیت خورا پیچلی دی.19 DLS او UV- په ترتیب سره په 8 شکل او ضمیمه شکل S5 کې ښودل شوي لید پایلې د دې موادو کیمیاوي جوړښت معاینه کولو او په مخکینۍ برخه کې د اندازه کولو سره د تړاو په واسطه تشریح کیدی شي.
شکل 8 د سیټریټ ختم شوي د سپینو زرو نانو ذراتو نمونې د متحرک رڼا توزیع پایلې د ډیریدونکي اندازې سره (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II او 50 nm: AgNP-III) د اوسط هایدروډینامیک قطر (Z اوسط) په توګه څرګند شوي. ) (ښي) د حجرو کلتور برخو DMEM او FBS په شتون کې، د زیټا احتمالي (کیڼ اړخ) په 24 ساعتونو کې بدلون راځي.
په DMEM کې د مختلفو اندازو AgNPs کمول د کولایډیل ثبات باندې ورته تاثیر لري چې د لوړ NaCl غلظت په شتون کې لیدل کیږي.په 50 v/v% DMEM کې د AgNP خپریدل وښودله چې په لویه پیمانه مجموعه د زیټا پوټینشن او Z - اوسط ارزښت او د SPR شدت د تیز کمښت سره کشف شوې.دا د یادولو وړ ده چې د DMEM لخوا د 24 ساعتونو وروسته د اعظمي مجموعي اندازه د پریمر نانو پارټیکل اندازې سره متناسب تناسب دی.
د FBS او AgNP ترمنځ تعامل ورته دی چې د کوچنیو مالیکولونو لکه ګلوکوز او ګلوټامین په شتون کې لیدل کیږي، مګر اغیز یې پیاوړی دی.د ذراتو Z اوسط غیر اغیزمن پاتې کیږي، پداسې حال کې چې د زیټا احتمالي زیاتوالی موندل شوی.د SPR چوکۍ یو څه سور بدلون ښودلی، مګر شاید ډیر په زړه پورې، د SPR شدت د کنټرول اندازه کولو په څیر د پام وړ کم شوی نه و.دا پایلې د نانو ذرات په سطح کې د میکرومولیکولونو د طبیعي جذب له لارې توضیح کیدی شي (په 4 شکل کې لاندې قطار) چې اوس په بدن کې د بایو مالیکولر کورونا رامینځته کیدو په توګه پیژندل کیږي.۴۹